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重视绪论教学是上好羊生产学的第一课 预览
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作者 马友记 朱才 姜仲文 《畜牧兽医杂志》 2019年第3期62-63,66共3页
精彩的课程“开场白”,能够营造出良好的教学情境,引起师生的共鸣,达到培养学生探究精神与激发学习兴趣的双重效果。本文结合笔者多年在《羊生产学》课程绪论教学过程中采用的“WWH”方法,分析绪论课讲解过程中需注意的问题,并提出上好... 精彩的课程“开场白”,能够营造出良好的教学情境,引起师生的共鸣,达到培养学生探究精神与激发学习兴趣的双重效果。本文结合笔者多年在《羊生产学》课程绪论教学过程中采用的“WWH”方法,分析绪论课讲解过程中需注意的问题,并提出上好入门第一课的合理化建议。 展开更多
关键词 羊生产学 绪论 改革 体会
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利用可变窗口FST方法检测不同尾型呼伦贝尔羊尾部脂肪沉积相关基因 预览
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作者 张统雨 樊红樱 +5 位作者 朱才 刘家鑫 邓天宇 杜立新 王立贤 赵福平 《畜牧兽医学报》 CSCD 北大核心 2018年第7期1354-1365,共12页
旨在挖掘控制绵羊尾型的候选基因,揭示绵羊尾部脂肪沉积机理。本研究利用呼伦贝尔羊两个不同尾型品系的288个个体,其中大尾羊142只和小尾羊146只,基于Illumina Ovine SNP 600KSNP芯片数据计算全基因组单点FST值。通过三次光滑样条估计... 旨在挖掘控制绵羊尾型的候选基因,揭示绵羊尾部脂肪沉积机理。本研究利用呼伦贝尔羊两个不同尾型品系的288个个体,其中大尾羊142只和小尾羊146只,基于Illumina Ovine SNP 600KSNP芯片数据计算全基因组单点FST值。通过三次光滑样条估计方法确定可变窗口大小和数量,构建W统计量并进行统计检验,鉴定选择区段和注释相关基因。结果,在基因组范围内共确定了23 144个可变窗口,其中区间最大的窗口位于chr12:35 241 750~43 798 950bp处,其大小为8.56 Mb,并包含775个SNPs。经检测发现,27个窗口达到极显著水平(P〈0.001),并鉴定了337个候选基因,其中22个是与已发现的脂肪代谢相关的基因。通过GO分析发现,这些候选基因主要富集在细胞内组成成分、有机氮化合物代谢过程以及小分子代谢过程等条目。通过可变窗口FST法能够有效检测到受选择的基因与绵羊尾部脂肪沉积相关。这些基因可以作为绵羊尾型选育的候选基因,为培育短尾绵羊提供重要依据。 展开更多
关键词 群体分化指数 可变窗口 呼伦贝尔羊 尾型 脂肪沉积
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羊重要性状全基因组关联分析研究进展 预览 被引量:3
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作者 张统雨 朱才 +1 位作者 杜立新 赵福平 《遗传》 CSCD 北大核心 2017年第6期491-500,共10页
全基因组关联分析(genome-wide association study,GWAS)是一种复杂性状功能基因鉴定的分析策略,已成为挖掘畜禽重要经济性状候选基因的重要手段。随着绵羊和山羊基因组完成和公布,以及不同密度的SNP(single nucleotide polymorphis... 全基因组关联分析(genome-wide association study,GWAS)是一种复杂性状功能基因鉴定的分析策略,已成为挖掘畜禽重要经济性状候选基因的重要手段。随着绵羊和山羊基因组完成和公布,以及不同密度的SNP(single nucleotide polymorphism)芯片的推出并进行商业化推广,不仅大大丰富了羊标记辅助选择可利用的分子标记,而且还为开展重要性状的分子机理的探索提供了重要技术支撑。本文主要针对羊角、羊毛、羊奶、生长发育、肉质、繁殖和疾病等重要性状的GWAS研究所用的群体、主要研究方法和研究结果进行了综述,并对GWAS方法研究现状进行了归纳,以期为进一步利用GWAS进行羊的各种性状的遗传基础研究提供参考。 展开更多
关键词 全基因组关联分析 基因组 单核苷酸多态性 复杂性状
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利用50K芯片数据分析中国11个地方绵羊群体的遗传结构 预览 被引量:3
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作者 袁泽湖 王慧华 +5 位作者 胡师金 朱才 赵福平 张莉 杜立新 魏彩虹 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期899-908,共10页
旨在构建我国绵羊群体遗传结构的精细图谱,为我国绵羊遗传资源的保存、利用提供依据。利用乌珠穆沁羊、湖羊、同羊、大尾寒羊、罗布羊、哈萨克羊、多浪羊、迪庆羊、青海臧羊、四川藏羊、西藏藏羊共计11个地方绵羊品种(资源)的Illumina... 旨在构建我国绵羊群体遗传结构的精细图谱,为我国绵羊遗传资源的保存、利用提供依据。利用乌珠穆沁羊、湖羊、同羊、大尾寒羊、罗布羊、哈萨克羊、多浪羊、迪庆羊、青海臧羊、四川藏羊、西藏藏羊共计11个地方绵羊品种(资源)的Illumina Ovine SNP 50K芯片数据,应用NETVIEW、PCA、STRUCTURE、NJ树等方法对群体结构进行分析。结果表明,乌珠穆沁羊与除罗布羊以外的蒙古系绵羊均有直接遗传关系,与罗布羊有间接的遗传关系。罗布羊与哈萨克系绵羊有较近的遗传关系,而哈萨克系的哈萨克羊与多浪羊存在较远的遗传关系。迪庆羊能够与藏系绵羊分离开,西藏地区藏羊能够与其他地区的藏羊分开,青海、四川的藏羊不能分开。结果提示,NETVIEW计算时间短,且基本能够反映史实,因而可以作为未来群体结构分析的工具;乌珠穆沁羊是此次试验选用的蒙古系绵羊中最古老的品种;蒙古系的罗布羊因混有哈萨克系绵羊的血统而与新疆地区的绵羊聚在一起;不同地区的藏羊存在着分化趋势,但分化并不严重。 展开更多
关键词 绵羊 群体结构 网络视图(NETVIEW)
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TXNRD1基因多态性与乌珠穆沁绵羊生长性状的关联分析 预览 被引量:5
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作者 马晓萌 轩俊丽 +8 位作者 王慧华 袁泽湖 吴明明 朱才 刘瑞凿 魏彩虹 赵福平 张莉 杜立新 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期909-921,共13页
本研究旨在探讨TXNRD1多态性与乌珠穆沁绵羊生长性状之间的关联性,以期找到与乌珠穆沁绵羊生长有关的分子标记。采用DNA混池测序技术筛选TXNRD1基因外显子突变位点,并采用质谱分型技术检测343头乌珠穆沁绵羊群体突变位点的基因型,并对... 本研究旨在探讨TXNRD1多态性与乌珠穆沁绵羊生长性状之间的关联性,以期找到与乌珠穆沁绵羊生长有关的分子标记。采用DNA混池测序技术筛选TXNRD1基因外显子突变位点,并采用质谱分型技术检测343头乌珠穆沁绵羊群体突变位点的基因型,并对其单个SNP及多个SNPs位点之间的组合基因型与生长性状之间进行关联分析。结果发现:在该基因第1外显子处发现1个C→T的错义突变(RS10);在第10外显子发现1个A→C同义突变(RS17);在第12外显子处发现1个T→C同义突变(RS18)。χ-2适合性检验表明,3个位点均处于HardyWeinberg平衡状态(P〉0.05)。连锁不平衡和单倍型分析表明:RS10-RS17,RS10-RS18两个位点之间可能存在强连锁,RS17-RS18之间弱连锁。CAT是优势单倍型,其频率为0.356。关联分析发现,每个位点的3种基因型的个体在4月龄体重和胸围上均有显著差异(P〈0.05)。RS10位点3种基因型的个体在6月龄体重、体高、胸围及胸宽上差异显著(P〈0.05),RS17位点3种基因型的个体在6月龄体高上差异显著(P〈0.05),RS18位点上3种基因型的个体在6月龄体重、体高、体斜长和胸围上有显著性差异(P〈0.05)。组合基因型关联分析发现,不同多态位点之间的组合基因型在乌珠穆沁绵羊不同生长性状之间差异显著(P〈0.05)。综上所述,可以将TXNRD1基因的多态性位点作为分子标记,在乌珠穆沁绵羊的选育中进行探索和尝试。 展开更多
关键词 乌珠穆沁绵羊 TXNRD1基因 多态性 生长性状 关联分析
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乌珠穆沁绵羊RIPK2基因多态性与生长性状的关联 预览 被引量:1
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作者 马晓萌 轩俊丽 +8 位作者 王慧华 袁泽湖 吴明明 朱才 刘瑞凿 魏彩虹 赵福平 杜立新 张莉 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1391-1407,共17页
【目的】基于前期绵羊肉用性状GWAS研究结果,旨在探讨RIPK2基因对乌珠穆沁绵羊生长性状的影响,找到该基因中与绵羊生长性状相关的分子标记,同时对GWAS结果进行验证。【方法】在343只乌珠穆沁绵羊试验群体中,选取其中30个个体的血液DNA样... 【目的】基于前期绵羊肉用性状GWAS研究结果,旨在探讨RIPK2基因对乌珠穆沁绵羊生长性状的影响,找到该基因中与绵羊生长性状相关的分子标记,同时对GWAS结果进行验证。【方法】在343只乌珠穆沁绵羊试验群体中,选取其中30个个体的血液DNA样本,以相同浓度组成池DNA,设计引物对RIPK2基因外显子及其上下游1 000bp的调控区进行PCR扩增,PCR产物检测为目的条带后测序。使用DNAMAN和Chromas2软件对测序峰图进行分析,采用飞行质谱方法对检测到的SNP位点及前期GWAS得到的SNP位点进行基因型分型。使用Haploview软件对多态位点构建单倍型及连锁不平衡分析。使用SPSS(22.0)软件进行RIPK2基因SNP位点与生长性状间的关联分析。【结果】共发现了4个多态位点,A5536G的同义突变rs01位于第四外显子内,在该位点检测到三种基因型,AA基因型频率为0.42,AG基因型频率为0.45,GG基因型频率为0.13,优势等位基因为A,其频率为0.65;在第七外显子上检测到T8952C错义突变rs02,在该突变位点检测到3种基因型,其中TT基因型频率为0.82,TC基因型频率为0.16,CC基因型频率为0.02,T为优势等位基因,基因频率为0.9;在第十外显子检测到T2836C的突变rs05,在该位点检测到两种基因型TT和CC,没有检测到杂合子基因型,TT基因型频率为0.25,CC基因型频率为0.75;上游调控区发现一个G5181C的突变rs30,有3种基因型,其中GC基因型频率为0.50,CC基因型频率为0.18,GG基因型频率为0.32,G为优势等位基因,其频率为0.58;GWAS得到的SNP位点是T4456C,在本研究中被命名为rs34,在该位点有3种基因型,其中TT基因型频率为0.49,TC基因型频率为0.37,CC基因型频率为0.14,优势等位基因T的频率为0.68。χ^2适合性检验发现,除rs34位点外,其余位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P〉0.05)。rs02位点处于低度多态(PIC〈0.25), 展开更多
关键词 RIPK2基因 生长性状 多态性 关联分析 乌珠穆沁绵羊
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绵羊胚胎发育中后期骨骼肌BTG2/3的表达动态及其与Myostatin的关系 预览 被引量:3
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作者 刘瑞凿 刘真 +6 位作者 吴明明 王慧华 朱才 张莉 赵福平 魏彩虹 杜立新 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1916-1923,共8页
旨在探究绵羊胚胎中后期骨骼肌BTG2/3(B cell translocation gene 2/3)的动态表达情况,探索肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)基因对其表达的影响。以特克赛尔(Texel)和乌珠穆沁(Ujimqin)绵羊85、100、120和135d4个不同发育阶段的胎儿背... 旨在探究绵羊胚胎中后期骨骼肌BTG2/3(B cell translocation gene 2/3)的动态表达情况,探索肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)基因对其表达的影响。以特克赛尔(Texel)和乌珠穆沁(Ujimqin)绵羊85、100、120和135d4个不同发育阶段的胎儿背最长肌为研究对象,利用Real-time PCR技术分别检测MSTN及BTG2/3的表达差异;选取100d各胚胎半膜肌、背最长肌、半腱肌和股四头肌检测不同组织BTG2/3的表达差异;构建稳定慢病毒干扰载体pFU-GW-myostatin,分别感染处于增殖和分化阶段的绵羊成肌细胞,检测BTG2/3表达水平变化。结果显示,随着胚胎生长,特克赛尔羊胎儿MSTN表达量持续下降,而乌珠穆沁羊胎儿先下降后上升,特克赛尔羊胎儿BTG2表达量呈先升高后降低趋势,而乌珠穆沁羊表现出先降低后升高再降低的趋势;BTG3的表达量在特克赛尔羊与BTG2表达趋势相同,而乌珠穆沁羊则与BTG2相反;100d胎儿4种不同骨骼肌组织中,特克赛尔羊与乌珠穆沁羊相比,背最长肌和半腱肌中BTG2表达量极显著偏高(P<0.01),而半膜肌和背最长肌中BTG3表达量极显著偏低(P<0.01);慢病毒干扰载体对成肌细胞具有较高的感染和干扰效率,增殖和分化阶段的成肌细胞被MSTN干扰后,BTG2和BTG3表达量极显著降低(P<0.01)。综上表明,BTG2和BTG3对绵羊胎儿中后期骨骼肌发育有重要作用,可能参与myostatin调节通路。本研究对绵羊胚胎发育过程的分子机制研究具有重要意义。 展开更多
关键词 BTG2/3 特克赛尔 乌珠穆沁 胎儿 myostatin干扰
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山羊骨骼肌卫星细胞系分离、培养及其成肌诱导分化研究 预览 被引量:2
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作者 李伟 郑蒙蒙 +4 位作者 邱峰龙 朱才 韦光辉 王丹 李碧春 《扬州大学学报:农业与生命科学版》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期12-17,共6页
采用外科手术方法从山羊四肢肌肉或背最长肌获取3mm×3mm肌肉束,置于1mg.mL-1 IV胶原酶中,室温消化30min,分散肌丝,在体视显微镜下分离肌丝;再用0.25%胰酶-EDTA于37℃下消化10min,以释放出骨骼肌卫星细胞(SSC)和其他细胞。连续5... 采用外科手术方法从山羊四肢肌肉或背最长肌获取3mm×3mm肌肉束,置于1mg.mL-1 IV胶原酶中,室温消化30min,分散肌丝,在体视显微镜下分离肌丝;再用0.25%胰酶-EDTA于37℃下消化10min,以释放出骨骼肌卫星细胞(SSC)和其他细胞。连续5代在增殖培养体系(80%DMEM/F12+10%胎牛血清+10%马血清)中采用差速贴壁方法,收集接种后20min的贴壁细胞,对纯化的SSC采用免疫荧光方法检测SSC特异标志蛋白Pax-7,结果表明:(92.5±3.4)%细胞表达Pax-7,(93.0±1.8)%细胞表达MyoD,说明90%以上细胞为SSC。将纯化的SSC细胞分别在诱导培养体系Ⅰ(93%DMEM/F12+1%胎牛血清+1%马血清+1%non-AA)和II(99%Opti-MEM+1%non-AA)中进行诱导培养,通过细胞形态学观察和成肌细胞早期标志蛋白Desmin、MyHC免疫荧光检测诱导效果,结果表明:采用体系Ⅱ能在各种细胞密度(大于1×105个.cm-2)下诱导山羊SSC向成肌方向分化,而采用体系Ⅰ(低血清培养基)且仅当能诱导高密度山羊SSC向成肌方向分化。采用改进的SSC分离方法能够获得较高纯度的卫星细胞,比较诱导体系Ⅰ、Ⅱ认为,诱导培养体系Ⅱ适合于山羊SSC成肌诱导分化,为进一步研究SSC成肌分化机制提供素材。 展开更多
关键词 山羊 骨骼肌卫星细胞 细胞培养 成肌诱导分化
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鸡Stra8基因真核表达载体构建及亚细胞定位的研究 被引量:1
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作者 王丹 张振韬 +7 位作者 施青青 黄晓梅 朱才 郑蒙蒙 李伟 徐剑蓉 王克华 李碧春 《中国家禽》 北大核心 2013年第8期10-13,共4页
试验旨在克隆苏禽黄鸡视黄酸激活基因8(Stra8)的cDNA序列,构建pEG—FP—C1-Stra8载体并制备鸡Stra8抗体。通过RT—PCR克隆苏禽黄鸡Stra8基因cDNA,构建pEGFP—C1-Stra8和pcDNA3.1(+)-Stra8重组质粒,分别转染NIH-3T3细胞和免疫... 试验旨在克隆苏禽黄鸡视黄酸激活基因8(Stra8)的cDNA序列,构建pEG—FP—C1-Stra8载体并制备鸡Stra8抗体。通过RT—PCR克隆苏禽黄鸡Stra8基因cDNA,构建pEGFP—C1-Stra8和pcDNA3.1(+)-Stra8重组质粒,分别转染NIH-3T3细胞和免疫小鼠制备抗体,间接免疫荧光法检测抗体效价以及在细胞中的分布。结果显示,苏禽黄鸡Stra8基因cDNA全长645bp,共编码214个氨基酸,提交至GenBank获得登录号为IX204292.1;成功制备Stra8多克隆抗体,pEGFP—C1-Stra8融合蛋白在NIH-3T3细胞质中表达。该结果为深入探讨禽类Stra8生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 Stra8基因 质粒DNA免疫 多克隆抗体 亚细胞定位
徐淮山羊SCD1基因的克隆和亚细胞定位研究及转基因小鼠的制备 预览 被引量:1
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作者 朱才 韦光辉 +5 位作者 李伟 王丹 郑蒙蒙 刘志永 张亚妮 李碧春 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第17期3695-3703,共9页
【目的】克隆徐淮山羊硬脂酰辅酶A脱氢酶1(SCD1)基因的cDNA并分析该基因生物信息学功能。通过EGFP融合蛋白在亚细胞水平定位该基因表达产物,研究该基因在异种动物体内表达情况,探索制备异种转基因动物的可能性及外源基因能否稳定遗... 【目的】克隆徐淮山羊硬脂酰辅酶A脱氢酶1(SCD1)基因的cDNA并分析该基因生物信息学功能。通过EGFP融合蛋白在亚细胞水平定位该基因表达产物,研究该基因在异种动物体内表达情况,探索制备异种转基因动物的可能性及外源基因能否稳定遗传。【方法】采用RT-PCR方法从徐淮山羊脂肪组织中克隆SCD1基因cDNA,进行生物信息学分析,并构建含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的融合表达载体pEGFP-C1-SCD1,脂质体(LTX)介导基因转染NHI-3T3细胞,48h后荧光倒置显微镜下观察基因表达产物的分布,RT-PCR检测mRNA在体外水平的表达。利用睾丸注射法制备转基因小鼠,在F1代和F2代个体DNA水平和蛋白水平上检测目的基因的表达情况。【结果】成功克隆出徐淮山羊SCD1基因的全序列cDNA,大小为1074bp,编码357个氨基酸,GenBank登录号为JX854036,徐淮山羊SCD1序列与人、褐家鼠、小家鼠、绵羊、牛和野猪相应编码区的同源性分别为86%、83%、82%、98%、95%、90%,氨基酸序列同源性分别为84%、79%、79%、96%、92%、95%;成功构建了融合表达载体pEGFP-C1-SCDl;RT-PCR检测mRNA表达明显;EGFP-SCDl融合蛋白定位在NIT-3T3细胞质中,与在线软件预测一致;通过尾静脉注射和睾丸注射,该基因可以在小鼠体内暂态表达和持续性表达,且可以稳定遗传。【结论】体外克隆的徐淮山羊SCD1基因cDNA在单细胞水平上表达于细胞质中,在小鼠体内也可以表达。 展开更多
关键词 徐淮山羊 硬脂酰辅酶A脱氢酶 真核表达 NIH-3T3细胞 荧光蛋白 转基因鼠
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过表达MyoD1基因山羊胎儿成纤维细胞系的建立及其成肌诱导分化 预览 被引量:5
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作者 李伟 郑蒙蒙 +4 位作者 张亚妮 朱才 邱峰龙 韦光辉 李碧春 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第14期3032-3039,共8页
【目的】通过建立过表达MyoD1基因山羊胎儿成纤维细胞系研究MyoD1基因的异位表达研究其在成肌分化中的生物作用。【方法】采用RT-PCR从激活的骨骼肌卫星细胞中克隆MyoD1基因,并将其cDNA终止密码子TGA定向突变为GGA,定向克隆至带有增强... 【目的】通过建立过表达MyoD1基因山羊胎儿成纤维细胞系研究MyoD1基因的异位表达研究其在成肌分化中的生物作用。【方法】采用RT-PCR从激活的骨骼肌卫星细胞中克隆MyoD1基因,并将其cDNA终止密码子TGA定向突变为GGA,定向克隆至带有增强型水母绿色荧光蛋白(ehanced green fluorescent protein,eGFP)报告基因的真核表达载体pEGFP-N1中,构建融合蛋白表达载体pEGFP-MyoD1,经过酶切、测序鉴定后,采用LipofectiminTMLTX转染山羊胎儿成纤维细胞(goat embryonic fibroblast,GEF)以建立MyoD1异位表达细胞株并采用成肌诱导分化培养液进行成肌诱导分化,探究MyoD1在成肌过程中的生物学功能。【结果】成功克隆山羊MyoD1基因,并在MyoD1的开放阅读框(ORF)两端引入XhoⅠ/EcoRⅠ酶切位点,将其终止密码子TGA定点突变为GGA,定向克隆至pEGFP-N1真核表达载体,获得融合蛋白表达载体pEGFP-MyoD1;经G418(400μg.mL-1)筛选2周后,获得MyoD1异位表达的GEF细胞株;间接免疫荧光(indirect immunofluorescence assay,IFA)检测结果显示该细胞株能够表达Myf-5等成肌相关免疫学标志;采用成肌分化培养基分化培养处理2—3 d可见少量肌管产生,并表达MyoG、Desmin和MyHC等早期成肌分化标志,处理5 d可见大量肌管形成。【结论】成功克隆出山羊MyoD1基因,构建了pEGFP-MyoD1真核表达载体并建立过表达MyoD1 GEF细胞系,过表达MyoD1 GEF系能够在成肌诱导培养液诱导形成肌管。 展开更多
关键词 MyoD1基因 基因克隆 异位表达 成肌分化
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睾丸注射法制备携带徐淮山羊过氧化氢酶体激活增殖受体γ基因转基因羊的研究 预览
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作者 朱才 李伟 +5 位作者 朱睿 韦光辉 邱峰龙 秦玉蓉 张亚妮 李碧春 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第6期153-157,共5页
为探究睾丸注射法制备转基因动物的可能性,将携带有徐淮山羊过氧化氢酶体激活增殖受体γ(PPARγ)和绿色荧光蛋白标签的重组载体经脂质体包裹后,将线性化的重组质粒pEGFP-PPARγ通过随机打点注射入性成熟的湖羊睾丸内,采用常规PCR、基... 为探究睾丸注射法制备转基因动物的可能性,将携带有徐淮山羊过氧化氢酶体激活增殖受体γ(PPARγ)和绿色荧光蛋白标签的重组载体经脂质体包裹后,将线性化的重组质粒pEGFP-PPARγ通过随机打点注射入性成熟的湖羊睾丸内,采用常规PCR、基因组DNA点杂交及蛋白免疫印迹技术检测外源PPARγ基因在湖羊体内稳定整合的能力,并检测F1代阳性个体屠宰性能、肌内脂肪含量、器官重量及肉品质。F1代羔羊检测转基因羊阳性率为13.7%,证实外源基因在转基因后代体内成功表达。阳性个体胴体重和屠宰率极显著低于对照组个体(P〈0.01),阳性个体骨肉比极显著高于对照组个体(P〈0.01);阳性个体背最长肌脂肪含量显著高于对照组个体(P〈0.05),腰肌内脂肪含量与股二头肌内脂肪含量差异不显著(P〉0.05);阳性个体肺脏和小肠极显著大于对照组个体(P〈0.01),阳性个体脾脏显著大于对照组个体(P〈0.05),阳性个体心脏和肺脏显著小于对照组个体(P〈0.05),肝脏、肾脏、胃、睾丸、皮、头之间差异不显著(P〉0.05);阳性个体股二头肌嫩度显著低于对照组个体(P〈0.05),pH、肉色、失水率之间差异不显著(P〉0.05)。 展开更多
关键词 过氧化氢酶体激活增殖受体 睾丸注射 转基因羊
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睾丸注射法制备携带山羊H-FABP基因的转基因小鼠 预览 被引量:4
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作者 阴彦辉 孙敏 +4 位作者 陈庭锋 张亚妮 朱才 李伟 李碧春 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期 727-735,共9页
为探究睾丸注射法制备转基因动物的可能性,文章将携带有山羊心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)和绿色荧光蛋白标签的重组载体经脂质体包裹后随机打点注射小鼠睾丸。对实验小鼠进行睾丸切片、精子荧光检测以及精子DNA检测,证实外源基因在... 为探究睾丸注射法制备转基因动物的可能性,文章将携带有山羊心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)和绿色荧光蛋白标签的重组载体经脂质体包裹后随机打点注射小鼠睾丸。对实验小鼠进行睾丸切片、精子荧光检测以及精子DNA检测,证实外源基因在亲代小鼠体内成功表达。睾丸注射后小鼠与正常母鼠交配产生的F1代,以及F1代自交产生的F2代在不同水平均可检测到外源基因的成功表达,阳性率分别为4%和30.23%。研究结果说明睾丸注射是一种制备转基因动物行之有效的方法,且外源基因可以稳定遗传。该方法的完善和成熟对于动物转基因以及动物性状改良和育种具有理论和实践意义。 展开更多
关键词 睾丸注射 转基因小鼠 心脏型脂肪酸结合蛋白
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徐淮山羊H-FABP基因克隆、表达产物亚细胞定位的研究及转基因小鼠的制备 预览 被引量:4
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作者 阴彦辉 韦光辉 +5 位作者 李伟 朱才 张亚妮 杜立新 曹文广 李碧春 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期 684-692,共9页
旨在克隆徐淮山羊心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因的cDNA,探讨其生物信息学功能。通过EGFP融合蛋白对该基因亚细胞水平的表达定位,探究该基因在异种生物体内表达情况,探索制备异种转基因动物的可能性。采用反转录PCR(RT-PCR)方法... 旨在克隆徐淮山羊心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因的cDNA,探讨其生物信息学功能。通过EGFP融合蛋白对该基因亚细胞水平的表达定位,探究该基因在异种生物体内表达情况,探索制备异种转基因动物的可能性。采用反转录PCR(RT-PCR)方法克隆徐淮山羊H-FABP基因cDNA,进行生物信息学分析,构建其融合表达载体pEGFP-H-FABP。脂质体(LTX)介导基因转染山羊成纤维细胞(GEF),48h后进行荧光检测,RT-PCR检测mRNA在细胞内的表达。利用睾丸注射将目的基因转入小鼠体内,在DNA和蛋白水平上检测目的基因的表达情况。结果,徐淮山羊H-FABP基因完整编码区(CDS)大小为402bp,编码133个氨基酸,GenBank登录号为AY466498.1。徐淮山羊H-FABP序列与人、鸡、褐家鼠、奶牛、野猪、驴及斑马鱼相应编码区同源性为89%、76%、85%、84%、93%、91%、70%,氨基酸序列同源性为90%、79%、88%、97%、95%、94%、72%。成功构建融合表达载体pEGFP-H-FABP,目的基因在mRNA水平上成功表达。目的蛋白定位于细胞质中,与在线预测结果相同(无信号肽,定位于细胞质中)。通过尾静脉注射和睾丸注射,该基因可以在小鼠体内实现暂态表达和持续性表达。本研究成功克隆了徐淮山羊H-FABP基因cDNA,而且H-FABP基因在进化过程中是保守的。该蛋白无信号肽,在单细胞水平上可表达于细胞质中,在小鼠体内也可以成功表达。 展开更多
关键词 徐淮山羊 心脏型脂肪酸结合蛋白 真核表达 荧光蛋白 转基因鼠
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锌源及锌水平对肉仔鸡血清生化指标的影响 预览 被引量:2
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作者 赵润梅 史兆国 +3 位作者 朱才 王玺年 贾伟 王婧 《湖南农业科学》 2010年第11期 134-135,146,共3页
为了探讨在玉米-豆粕型日粮中添加锌源和锌水平对肉仔鸡血清总蛋白、白蛋白和碱性磷酸酶的影响,采用2×4因子试验设计,选用硫酸锌和蛋氨酸锌2种锌源,306、0、90、120 mg/kg 4个添加水平,构成8种试验日粮。将1日龄AA肉仔鸡384只,随... 为了探讨在玉米-豆粕型日粮中添加锌源和锌水平对肉仔鸡血清总蛋白、白蛋白和碱性磷酸酶的影响,采用2×4因子试验设计,选用硫酸锌和蛋氨酸锌2种锌源,306、0、90、120 mg/kg 4个添加水平,构成8种试验日粮。将1日龄AA肉仔鸡384只,随机分为8个处理,每个处理4个重复,每个重复12只。试验结果表明:锌源和锌水平对血清总蛋白、白蛋白和碱性磷酸酶活性影响差异不显著(p〉0.05)。 展开更多
关键词 肉鸡 血清 生化指标
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