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两种酶水解制备丝素肽的抗菌性及对人胚肾细胞的毒性分析 预览
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作者 杨沙 +4 位作者 陈果 赵一萍 彭娅林 周游 徐立 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期115-121,共7页
以废蚕茧为原料,通过Na2CO3脱胶、溶解、透析、冷冻干燥后得到丝素蛋白粉末。用蒸馏水溶解后,分别采用碱性蛋白酶(alcalase)、木瓜蛋白酶(papain)水解丝素蛋白,85℃将酶灭活,得到丝素肽溶液。采用反相高效液相色谱仪对10种丝素肽组分进... 以废蚕茧为原料,通过Na2CO3脱胶、溶解、透析、冷冻干燥后得到丝素蛋白粉末。用蒸馏水溶解后,分别采用碱性蛋白酶(alcalase)、木瓜蛋白酶(papain)水解丝素蛋白,85℃将酶灭活,得到丝素肽溶液。采用反相高效液相色谱仪对10种丝素肽组分进行分析,并研究丝素肽对大肠杆菌(Escherichia coli)及金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的抗菌效果,以及对人胚肾细胞(HEK293)的毒性。发现P1、A2、A4、A1丝素肽对大肠杆菌生长有抑制作用,P1、P2、P3丝素肽对金黄色葡萄球菌生长有抑制作用,具有抑菌作用的这6种丝素肽对HEK293细胞增殖没有毒性,且A1、A2、A4、P2丝素肽对HEK293细胞存活具有促进作用,为今后丝素肽的产品开发、生产及应用奠定一定的理论基础。 展开更多
关键词 酶解 丝素肽 抗菌性 细胞毒性 反相高效液相色谱
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基于文献统计分析桑树研究的进展 预览
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作者 刘胜胜 杨帆 +3 位作者 丁雪莹 周游 徐立 《蚕学通讯》 2019年第1期22-30,共9页
通过对国内外各大数据库中桑树相关文献量的计量,对桑树的研究状况进行了分析。结果显示,桑叶作为家蚕饲料的传统农业模式已被打破,现已转向涉及医药、食品与保健等领域的多元化发展的桑树资源综合开发利用模式。其中,对桑树活性物质的... 通过对国内外各大数据库中桑树相关文献量的计量,对桑树的研究状况进行了分析。结果显示,桑叶作为家蚕饲料的传统农业模式已被打破,现已转向涉及医药、食品与保健等领域的多元化发展的桑树资源综合开发利用模式。其中,对桑树活性物质的研究由生物碱类物质转向多酚类物质和多糖类物质,桑树的抑制肿瘤和抗癌活性逐渐被重视,国内研究者对桑树的研究深度及影响力逐年提高。该结果可为桑树资源的进一步研究提供一定的参考。 展开更多
关键词 桑树 文章 专利 组织部位 生物活性 生物活性物质
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桑枝提取物中3种代表性黄酮的含量测定及抗氧化活性评价 预览
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作者 刘胜胜 喻艳 +2 位作者 周游 徐立 《蚕学通讯》 2018年第4期7-14,共8页
黄酮是桑枝中的一大类活性物质,芦丁、槲皮素和桑色素是其中具有代表性的3种。本实验采用高效液相色谱(HPLC)法,以人工三倍体桑树品种嘉陵20号枝条为材料,测定了其提取物中芦丁、桑色素和槲皮素的含量,并以维生素E为阳性对照,对它们进... 黄酮是桑枝中的一大类活性物质,芦丁、槲皮素和桑色素是其中具有代表性的3种。本实验采用高效液相色谱(HPLC)法,以人工三倍体桑树品种嘉陵20号枝条为材料,测定了其提取物中芦丁、桑色素和槲皮素的含量,并以维生素E为阳性对照,对它们进行了抗氧化能力评估,主要包括:DPPH自由基(DPPH·)清除力、ABTS自由基(ABTS^+)清除力、总还原力和DNA损伤保护潜力。结果表明:桑枝中的黄酮类成分含量较高,芦丁、桑色素、槲皮素的含量分别为1.41mg/g、0.63mg/g、1.08mg/g;应试样品均表现出良好的抗氧化活性,其中槲皮素的DPPH·清除力(IC50=0.042mg/mL)和总还原力最强,提取物的ABTS+清除力(IC50=0.019mg/mL)最强;桑枝总黄酮提取物、桑色素和槲皮素三者的DNA保护潜力相当,且均高于阳性对照。该结果为蚕桑产业中桑枝的开发和利用提供了理论基础。 展开更多
关键词 桑枝 HPLC 黄酮 含量 抗氧化活性
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南方水牛奶酪蛋白及大豆蛋白肽指纹图谱的差异性 预览 被引量:4
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作者 徐明芳 戴金凤 +4 位作者 向明霞 曾晓琮 万丛庆 周卫军 《华南理工大学学报:自然科学版》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第6期136-144,共9页
通过LTQ Orbitrap XL组合型傅里叶变换高分辨质谱与反相高效液相色谱技术联用建立了南方水牛奶酪蛋白和大豆蛋白主要组分肽质指纹图谱,并对其氨基酸组成与序列进行了比较.结果表明:酪蛋白经胰蛋白酶酶解后得到的28个肽段中没有检测... 通过LTQ Orbitrap XL组合型傅里叶变换高分辨质谱与反相高效液相色谱技术联用建立了南方水牛奶酪蛋白和大豆蛋白主要组分肽质指纹图谱,并对其氨基酸组成与序列进行了比较.结果表明:酪蛋白经胰蛋白酶酶解后得到的28个肽段中没有检测到与酶解大豆分离蛋白181个肽段相匹配的肽段;酪蛋白(CN)的主要组分是仅αs1-CN、β-CN、κ-CN,大豆蛋白的主要组分为大豆球蛋白(包括大豆球蛋白Gl~G5亚基)和/3伴大豆球蛋白(α,α′,β 链);水牛奶酪蛋白和大豆蛋白在亚基组分的氨基酸数量、组成比例和排列方式均呈现出明显的差异,大豆蛋白的各组分亚基的氨基酸全序列均大于酪蛋白各组分的氨基酸全序列,且大豆蛋白各组分的分子质量均显著高于酪蛋白各组分.LTQOr-bitrap XL质谱技术对乳源蛋白肽质指纹的分析,为今后鉴定分析牛奶蛋白中是否添加廉价蛋白提供了高精度和高准确度的检测方法,也为复杂混合物中的痕量组分检测提供了理论依据. 展开更多
关键词 水牛奶酪蛋白 大豆蛋白 LTQ ORBITRAP XL 肽指纹图谱 氨基酸序列
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基于LTQ-Orbitrap液相色谱-质谱联用技术的乳源乳清蛋白组分的差异性研究 预览 被引量:4
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作者 徐明芳 戴金凤 +4 位作者 向明霞 曾晓琮 万丛庆 周卫军 《分析化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2014年第4期501-506,共6页
利用LTQ Orbitrap XL组合型傅立叶变换高分辨质谱系统分析了乳源蛋白主要组分肽指纹图谱.对南方水牛乳与不同来源的乳清蛋白的氨基酸序列研究结果表明,乳清蛋白经酶解后主要为α-乳白蛋白(α-La)和β-乳球蛋白(β-Lg)组分,乳清蛋白... 利用LTQ Orbitrap XL组合型傅立叶变换高分辨质谱系统分析了乳源蛋白主要组分肽指纹图谱.对南方水牛乳与不同来源的乳清蛋白的氨基酸序列研究结果表明,乳清蛋白经酶解后主要为α-乳白蛋白(α-La)和β-乳球蛋白(β-Lg)组分,乳清蛋白肽质指纹谱的分析显示水牛乳与荷斯坦奶乳清蛋白α-La氨基酸发生变异的比率明显少于山羊奶乳清蛋白α-La,说明荷斯坦奶α-La和水牛乳α-La的差异更小,同源性更强;而水牛乳β-Lg与荷斯坦乳β-Lg氨基酸发生变异的部位比率要多于山羊奶,水牛乳β-Lg与山羊奶同源性更强;乳源酪蛋白酶解后的肽段主要组分为αs1-CN,β-CN,κ-N,通过对水牛乳酪蛋白的氨基酸序列的差异性分析,不同品种的乳源酪蛋白的氨基酸序列明显存在差异.与乳清蛋白相比,奶牛品种差异导致乳蛋白发生氨基酸差异现象更显著,酪蛋白的氨基酸序列对比表明,水牛奶酪蛋白与山羊奶酪蛋白比与乳牛酪蛋白的差异更大. 展开更多
关键词 LTQ Orbitrap质谱 乳源蛋白 酪蛋白 乳清蛋白 肽质指纹谱 差异性
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DEAE-Sepharose CL-6B离子交换色谱分离αs酪蛋白的研究 预览
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作者 向明霞 王丽娜 +2 位作者 李子超 徐明芳 《四川大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期371-376,共6页
本文建立了酪蛋白中主要组分αs酪蛋白离子交换色谱分离的方法.结果表明,用Z系列φ1.0×40cm色谱柱,DEAE-Sepharose CL-6B为离子交换介质,以含3mol/L尿素,0.1%β-巯基乙醇,pH值为8.0的50mmol/L的tris-HCl缓冲液为平衡液,用含不同浓... 本文建立了酪蛋白中主要组分αs酪蛋白离子交换色谱分离的方法.结果表明,用Z系列φ1.0×40cm色谱柱,DEAE-Sepharose CL-6B为离子交换介质,以含3mol/L尿素,0.1%β-巯基乙醇,pH值为8.0的50mmol/L的tris-HCl缓冲液为平衡液,用含不同浓度NaCl的平衡液进行洗脱,流速为2mL/min,在280nm紫外检测波长下检测,当NaCl浓度为0.3mol/L时洗脱得到αs-酪蛋白,其纯度可达100%.此方法可高效快速的分离出αs酪蛋白,为酪蛋白组分进一步分离及αs酪蛋白相关的功能性食品的开发奠定了基础. 展开更多
关键词 酪蛋白 离子交换色谱 电泳 高效液相色谱
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巴氏杀菌与超高温灭菌牛乳酪蛋白结构差异性的研究 预览 被引量:10
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作者 李子超 徐明芳 +1 位作者 向明霞 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期192-196,共5页
采用圆二色谱(CD)、荧光分光光度计、扫描电子显微镜(SEM)、纳米粒度仪对巴氏杀菌与超高温灭菌(UHT)牛乳酪蛋白的二级结构、内源荧光发射光谱、胶束形态结构、粒径分布情况进行研究.结果表明,相对于巴氏杀菌牛乳酪蛋白(α-螺旋47... 采用圆二色谱(CD)、荧光分光光度计、扫描电子显微镜(SEM)、纳米粒度仪对巴氏杀菌与超高温灭菌(UHT)牛乳酪蛋白的二级结构、内源荧光发射光谱、胶束形态结构、粒径分布情况进行研究.结果表明,相对于巴氏杀菌牛乳酪蛋白(α-螺旋47.4%、β-折叠19.7%、β-转角13.4%、无规卷曲19.4%),UHT牛乳酪蛋白的无规则结构增多(α-螺旋22.1%、β-折叠23.1%、β-转角22.4%、无规卷曲33.4%);UHT牛乳酪蛋白色氨酸在酪蛋白中所处的环境疏水性增强;巴氏杀菌牛乳酪蛋白颗粒呈圆球状,表面光滑,能够连接成较短的胶束结构,而UHT牛乳酪蛋白表面不光滑,几乎不能形成胶束;巴氏杀菌牛乳酪蛋白平均粒径为295.1 nm,UHT乳酪蛋白平均颗粒明显变小,平均粒径为221.7 nm.可见,巴氏杀菌乳与超高温灭菌乳之间存在明显的结构差异. 展开更多
关键词 巴氏杀菌 超高温灭菌 酪蛋白 结构
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响应面法优化水牛乳酪蛋白源抗菌肽制备条件 预览 被引量:3
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作者 李子超 +1 位作者 向明霞 徐明芳 《食品科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第23期215-218,共4页
采用胰蛋白酶酶解南方水牛乳酪蛋白,以获得具有抗菌性的酶解产物。单因素试验表明,胰蛋白酶酶解酪蛋白的最佳酶解温度、酶解时间、酶与底物比分别为41℃、3h、2.0%,Box-Behnken响应曲面的中心组合试验优化结果表明:最佳酶解条件为:酶... 采用胰蛋白酶酶解南方水牛乳酪蛋白,以获得具有抗菌性的酶解产物。单因素试验表明,胰蛋白酶酶解酪蛋白的最佳酶解温度、酶解时间、酶与底物比分别为41℃、3h、2.0%,Box-Behnken响应曲面的中心组合试验优化结果表明:最佳酶解条件为:酶解温度43℃、酶解时间3.4h、最佳酶与底物比2.5%,此条件下酪蛋白的水解度为4.76%,酶解产生抗菌肽复合物对大肠杆菌(Escherichia coli)抑菌率可以达到81.34%。 展开更多
关键词 酪蛋白 抗菌肽 优化 响应面
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应用双向电泳和质谱联用技术研究乳源蛋白的差异性 被引量:1
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作者 向明霞 王丽娜 +3 位作者 李昀锴 李子超 徐明芳 《分析试验室》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期5-8,共4页
应用双向电泳和质谱联用技术,对不同乳源蛋白的差异性进行了研究。根据ImageMaster 2DPlatinum图像分析软件对不同乳源酪蛋白和乳清蛋白的双向电泳(2-DE)图谱进行蛋白斑点的匹配分析,获得21个存在于水牛奶中主要分布在低丰度蛋白区的... 应用双向电泳和质谱联用技术,对不同乳源蛋白的差异性进行了研究。根据ImageMaster 2DPlatinum图像分析软件对不同乳源酪蛋白和乳清蛋白的双向电泳(2-DE)图谱进行蛋白斑点的匹配分析,获得21个存在于水牛奶中主要分布在低丰度蛋白区的酪蛋白差异蛋白点和24个存在于水牛奶中乳清蛋白差异蛋白点。这些差异蛋白点经质谱鉴定分析,得到4个属于水牛奶酪蛋白的主要组分和2个与水牛奶中酪蛋白有较高同源性的新组分,同时获得4个属于水牛奶乳清蛋白的主要组分和3个与水牛奶中乳清蛋白有较高同源性的组分。 展开更多
关键词 水牛奶 酪蛋白 乳清蛋白 双向电泳 质谱
基于双向电泳和质谱联用技术的水牛乳源酪蛋白的研究 预览 被引量:4
10
作者 向明霞 王丽娜 +2 位作者 李子超 徐明芳 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期 188-190,200,共4页
利用双向电泳和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-MS)联用技术对水牛乳酪蛋白与其他乳源蛋白差异性进行了研究。根据Image Master 2D Platinum图像分析软件对不同乳源酪蛋白的双向电泳(2-DE)图谱进行蛋白斑点的匹配分析,获... 利用双向电泳和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-MS)联用技术对水牛乳酪蛋白与其他乳源蛋白差异性进行了研究。根据Image Master 2D Platinum图像分析软件对不同乳源酪蛋白的双向电泳(2-DE)图谱进行蛋白斑点的匹配分析,获得21个存在于水牛奶中,主要分布在低丰度蛋白区的差异蛋白点,经质谱分析,得到4个属于水牛奶酪蛋白的主要组分,另外发现两个与水牛奶中的蛋白有较高同源性的新组分。 展开更多
关键词 水牛奶 酪蛋白 双向电泳 质谱
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LTQ-Orbitrap液-质联用技术对水牛奶酪蛋白的鉴定 预览 被引量:4
11
作者 王丽娜 徐明芳 +3 位作者 向明霞 李子超 李昀锴 《食品科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期 98-102,共5页
建立一种快速、高效的分析酪蛋白组分氨基酸序列的LTQ-Orbitrap质谱方法。为了研究水牛奶酪蛋白、乳牛奶酪蛋白和山羊奶酪蛋白的氨基酸序列组成及氨基酸的替换现象,采用LTQ-Orbitrap液-质联用技术分别对乳源酪蛋白的4种主要组分进行分析... 建立一种快速、高效的分析酪蛋白组分氨基酸序列的LTQ-Orbitrap质谱方法。为了研究水牛奶酪蛋白、乳牛奶酪蛋白和山羊奶酪蛋白的氨基酸序列组成及氨基酸的替换现象,采用LTQ-Orbitrap液-质联用技术分别对乳源酪蛋白的4种主要组分进行分析,搜索数据库获得4种组分的氨基酸全序列。与水牛奶4种酪蛋白组分进行比对。结果表明,乳牛奶的4种酪蛋白发生氨基酸替换的部位和比率明显小于山羊奶。这意味着与水牛奶酪蛋白相比,乳牛奶酪蛋白氨基酸的稳定性优于山羊奶酪蛋白。 展开更多
关键词 水牛奶 酪蛋白 氨基酸序列 酪蛋白结构 LTQ-Orbitrap质谱
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反相高效液相色谱法对南方水牛乳乳清蛋白的分离和定量分析 被引量:2
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作者 李昀锴 +2 位作者 向明霞 李子超 徐明芳 《食品科技》 CAS 北大核心 2012年第11期289-292,共4页
采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)对广东水牛乳乳清蛋白成分进行了分离和定量分析研究。结果表明乳清蛋白得到较好的分离且重复性良好,3种主要蛋白质(α-La、p-Lg、BSA)回归方程的线性关系〉99%,且其保留时间和峰面积的RSD分别小... 采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)对广东水牛乳乳清蛋白成分进行了分离和定量分析研究。结果表明乳清蛋白得到较好的分离且重复性良好,3种主要蛋白质(α-La、p-Lg、BSA)回归方程的线性关系〉99%,且其保留时间和峰面积的RSD分别小于0.443和2.67,加标回收率范围为99.5%-101%。在相同条件下对南方水牛乳及荷斯坦牛乳进行差异性分析,表明两种乳源乳清蛋白在组分含量和遗传变异体方面均有明显的差异。 展开更多
关键词 反相高效液相色谱法 乳清蛋白 水牛乳 牛乳 蛋白质
两种快速分离检测南方水牛乳乳清蛋白方法的比较 预览 被引量:1
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作者 李昀锴 +1 位作者 向明霞 徐明芳 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2012年第5期 55-57,64,共4页
采用了毛细管电泳法(cE)和反相高效液相色谱法(RP-HPLC)两种方法对乳源乳清蛋白进行分离检测。结果表明:两种方法都能够有效分离乳清蛋白中BSA,α-La,β-k,并能对各种蛋白进行定性定量分析。相比而言,毛细管电泳法分离更加快... 采用了毛细管电泳法(cE)和反相高效液相色谱法(RP-HPLC)两种方法对乳源乳清蛋白进行分离检测。结果表明:两种方法都能够有效分离乳清蛋白中BSA,α-La,β-k,并能对各种蛋白进行定性定量分析。相比而言,毛细管电泳法分离更加快速,整个分离过程7min左右即可完成,能分离出IgG组分。TRP-HPLC分离时间更长,需要45min才能完全分离,并且无法分离出IgG组分。 展开更多
关键词 毛细管电泳法 RP-HPLC 牛奶 乳清蛋白
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