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中间球海胆乳酸脱氢酶基因克隆及其对海水酸化的响应 预览
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作者 任丽媛 +4 位作者 邢冬飞 孙景贤 李莹莹 常亚青 湛垚垚 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1423-1437,共15页
为明确中间球海胆乳酸脱氢酶(LDH)基因序列及表达特征,研究其对海水酸化胁迫的响应,实验利用cDNA末端快速扩增(RACE)技术获得中间球海胆LDH基因(命名为SiLDH)的全长cDNA,并且比较了海水酸化胁迫下,中间球海胆不同组织SiLDH基因表达及总... 为明确中间球海胆乳酸脱氢酶(LDH)基因序列及表达特征,研究其对海水酸化胁迫的响应,实验利用cDNA末端快速扩增(RACE)技术获得中间球海胆LDH基因(命名为SiLDH)的全长cDNA,并且比较了海水酸化胁迫下,中间球海胆不同组织SiLDH基因表达及总LDH活性的变化情况。结果显示:①SiLDH基因的cDNA全长为1 499 bp,包含133 bp的5′非编码区,349 bp的3′非编码区和1 017 bp编码338个氨基酸的开放阅读框(ORF)。SiLDH编码蛋白的相对分子量为36.40 ku,理论等电点为6.55,属于无信号肽的非跨膜、温和疏水蛋白。②生物信息学分析显示,SiLDH蛋白序列与紫球海胆LDH X4蛋白序列一致性最高(90.88%)。③实时荧光定量PCR(qRT-PCR)发现,SiLDH基因在检测的4种组织中均有表达,相对表达量从高到低为性腺>管足>肠>体腔液;总LDH活性检测显示,中间球海胆总LDH活性从高到低为性腺>管足>体腔液>肠;④海水酸化处理60 d后发现,与自然海水组(pH 8.06±0.01)相比,SiLDH基因在中间球海胆性腺、管足和肠道中呈现总体降低趋势,在体腔液中则呈现随海水pH降低先降低后显著升高的趋势;总LDH活性在性腺、管足和体腔液中呈现随海水pH降低而降低的趋势,在肠道中则呈现随海水pH降低先降低后显著升高的趋势。研究表明,中间球海胆面对海水酸化时可能通过调节SiLDH基因的表达和LDH活性来缓解海水酸化带来的负面影响。 展开更多
关键词 中间球海胆 乳酸脱氢酶 海水酸化 基因克隆 基因表达 酶活性
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生态因子对萱藻生长发育影响的研究现状及展望 预览
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作者 邢冬飞 +2 位作者 张鑫铭 姜佳豪 李晓丽 《河北渔业》 2019年第4期48-51,56共5页
主要阐述了国内外有关于生态因子对萱藻( Scytosiphon lomentaria )生长发育影响的研究现状,并对有关于萱藻的进一步研究提出了展望。温度、光照、盐度、营养液及抗生素等生态因子均会对萱藻生长发育造成不同程度的影响,温度和光照变化... 主要阐述了国内外有关于生态因子对萱藻( Scytosiphon lomentaria )生长发育影响的研究现状,并对有关于萱藻的进一步研究提出了展望。温度、光照、盐度、营养液及抗生素等生态因子均会对萱藻生长发育造成不同程度的影响,温度和光照变化对萱藻生长发育的影响最为明显。萱藻配子体阶段的适宜温度较低,为6~12 ℃,而孢子体阶段在5~23 ℃范围内均可生长,生长速度随温度上升而增加;萱藻不同生长阶段的最适光照强度也有所不同,萱藻配子体阶段的最适光照范围为36~54 μmol·m^-2 ·s^-1 ,较低光强6~30 μmol·m ^-2 ·s^-1 是萱藻孢子体生长发育的适宜范围,而高光强54 μmol·m^-2 ·s^-1 有利于萱藻孢子的附着;盐度、pH对萱藻生长发育影响显著,过高或过低均不利于萱藻生长;不同营养盐、维生素及抗生素对萱藻的生长发育产生的影响不同,在萱藻不同的生长阶段,应根据生长状况及时给予适宜浓度的营养盐或药物添加剂以促进萱藻生长。 展开更多
关键词 萱藻(Scytosiphon lomentaria) 配子体 孢子体 生态因子 生长发育
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光棘球海胆(Mesocentrotus nudus)TGF-β基因克隆及其对海水酸化的响应 预览
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作者 李莹莹 +5 位作者 常亚青 柳林 张宝警 姜惠婷 刘印 湛垚垚 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期116-128,共13页
旨在明确光棘球海胆(Mesocentrotus nudus)转化生长因子-β(transforming growth factor β,TGF-β)基因的序列及结构信息,探明该基因在海水酸化胁迫下的表达模式。利用同源克隆和cDNA末端快速扩增(RACE)技术首次获得光棘球海胆TGF-β基... 旨在明确光棘球海胆(Mesocentrotus nudus)转化生长因子-β(transforming growth factor β,TGF-β)基因的序列及结构信息,探明该基因在海水酸化胁迫下的表达模式。利用同源克隆和cDNA末端快速扩增(RACE)技术首次获得光棘球海胆TGF-β基因(命名为MnTGF-β)的全长cDNA序列。结果显示:(1)光棘球海胆TGF-β基因的cDNA全长为2299bp,其中5'非编码区长度为745bp,3'非编码区长度为261bp;开放阅读框(ORF)长度为1290bp,编码430个氨基酸,相对分子量为48.31kD,理论等电点为5.34。(2)同源性及系统进化分析显示,光棘球海胆MnTGF-β蛋白序列与紫球海胆(Strongylocentrotus purpuratus)SpTGF-β2蛋白序列高度保守(同源性97.69%)。(3)实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测发现,MnTGF-β基因在光棘球海胆性腺、体腔液、肠、围口膜、管足5种组织中均有表达,其相对表达量从高到低依次为:管足 >围口膜 >肠 >体腔液 >性腺。(4)与自然海水组(pH8.06±0.01)相比,当海水△pH为-0.3时,随酸化时间延长,MnTGF-β基因在光棘球海胆性腺中的相对表达量呈先升高而后极显著降低(P<0.01)再极显著升高(P<0.01)趋势,在管足中的相对表达量呈现极显著上调趋势(P<0.01),而在肠组织中的相对表达量则先极显著降低(P<0.01)而后显著升高(P<0.05);当海水△pH为-0.4和-0.5时,随酸化时间的延长,MnTGF-β基因在光棘球海胆性腺和管足中的相对表达量呈现先降低后升高的趋势,而在肠组织中的相对表达量则呈现极显著降低趋势(P<0.01)。 展开更多
关键词 光棘球海胆 转化生长因子-Β 基因克隆 海水酸化 表达模式
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水产动物Akt基因研究进展 预览
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作者 刘丽 孙景贤 +4 位作者 常亚青 李莹莹 李开全 湛垚垚 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期602-609,共8页
Akt(RAC-alpha serine/threonine-protein kinase)是一种丝氨酸(Ser)或苏氨酸(Thr)蛋白激酶,也称为蛋白激酶B(PKB),可以磷酸化多种转录因子,在细胞增殖、细胞免疫应答、细胞代谢调控、细胞发育及存活等过程中发挥重要作用。目前有关水... Akt(RAC-alpha serine/threonine-protein kinase)是一种丝氨酸(Ser)或苏氨酸(Thr)蛋白激酶,也称为蛋白激酶B(PKB),可以磷酸化多种转录因子,在细胞增殖、细胞免疫应答、细胞代谢调控、细胞发育及存活等过程中发挥重要作用。目前有关水产动物Akt基因及其生物学功能的研究处于起步阶段,资料尚缺乏,本研究中就近年来水产动物Akt基因的序列特征、进化特点、参与的主要通路,以及参与调控鱼类的胚胎发育过程、甲壳类与贝类的免疫防御过程等生物功能等进行综述,指出今后可利用同源克隆或基因组数据挖掘技术获得更多水产动物的Akt基因信息,以便系统和全面地了解该基因在水产动物中的系统进化特点和规律,深入探究不同生理、病理条件下,不同水产动物的Akt基因的响应规律及该基因与其下游靶基因的互作机制,进一步筛选和挖掘能够调控水产动物Akt基因表达的表观遗传调控因子。本研究结果可为充分认识和利用水产动物Akt基因的生物学功能提供更为丰富的资料和线索。 展开更多
关键词 AKT基因 蛋白激酶B 水产动物 研究进展
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不同海水酸化模式对马粪海胆胚胎和浮游幼体骨针发育的影响 预览
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作者 李家祥 杨梦羽 +7 位作者 孙景贤 李莹莹 常亚青 胡婉彬 段立柱 张伟杰 湛垚垚 《海洋通报:英文版》 CAS 2018年第1期21-40,共20页
为了比较CO2引起的海水酸化和HCI引起的海水酸化对棘皮动物的影响,本研究以中国北方海岸带土著种一马粪海胆(Hemicentrotus pulcherrimuS)为对象,分析比较了两种海水酸化模式对马粪海胆胚胎和骨针发育的影响。根据IPCC对2100年海水... 为了比较CO2引起的海水酸化和HCI引起的海水酸化对棘皮动物的影响,本研究以中国北方海岸带土著种一马粪海胆(Hemicentrotus pulcherrimuS)为对象,分析比较了两种海水酸化模式对马粪海胆胚胎和骨针发育的影响。根据IPCC对2100年海水酸化程度的预测,在实验室条件下,建立了自然海水组(pH=806±001)和六个海水酸化处理组(三个CO2处理组和三个HCI处理组)。结果表明:(1)与自然海水组相比,酸化处理组马粪海胆胚胎的卯裂率呈现随海水pH下降而延长的趋势,与HCI酸化处理相比,CO2处理对马粪海胆胚胎卯裂率的影响更为严重;(2)两种海水酸化模式下,马粪海胆浮游幼体四腕浮游幼体均出现对称性缺失和骨针外露现象;(3)与自然海水组相比,两种海水酸化模式对马粪海胆四腕浮游幼体骨针发育具有不同影响,HCI酸化处理组浮游幼体呈现骨针变短现象,而CO2处理组四腕幼体的骨针则出现变长现象;(4)扫描电镜结果显示,海水酸化可影响马粪海胆浮游幼体骨针的钙化结构,当海水△pH=0.5时,CO2处理组马粪海胆浮游幼体骨针的腐蚀程度要比HCI处理组更为严重。本研究结果提示.不同的海水酸化模式对马粪海胆胚胎和骨针发育有不同程度的影响,相比强酸(HCI)引起的海水酸化而言,CO2引起的海水酸化对马粪海目旦的影响可为严蕈。 展开更多
关键词 海水酸化 马粪海胆 胚胎发育 浮游幼体 骨针发育
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