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家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂Bmserpin2对酚氧化酶原激活和抗菌肽基因表达的抑制作用 认领
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作者 李冰 孙帆 +2 位作者 陶姗姗 叶崇军 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期798-806,共9页
【目的】丝氨酸蛋白酶抑制剂家族蛋白是昆虫中调控自身免疫反应的重要蛋白酶抑制剂,本研究旨在研究家蚕Bombyx mori丝氨酸蛋白酶抑制剂2(Bmserpin2)在家蚕2个重要的自身免疫通路即酚氧化酶原(prophenol oxidase,PPO)激活通路和革兰氏阳... 【目的】丝氨酸蛋白酶抑制剂家族蛋白是昆虫中调控自身免疫反应的重要蛋白酶抑制剂,本研究旨在研究家蚕Bombyx mori丝氨酸蛋白酶抑制剂2(Bmserpin2)在家蚕2个重要的自身免疫通路即酚氧化酶原(prophenol oxidase,PPO)激活通路和革兰氏阳性菌诱导抗菌肽的TOLL通路中的调控作用。【方法】PCR扩增家蚕Bmserpin2基因片段后原核表达并通过镍柱纯化。利用纯化后的重组Bmserpin2蛋白分别与胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、弹性蛋白酶和蛋白酶K反应,检测Bmserpin2对上述蛋白酶活性的影响。通过RT-qPCR检测Bmserpin2在家蚕5龄第3天幼虫头、中肠、脂肪体、血淋巴、丝腺和表皮组织中表达的模式。往家蚕5龄第3天幼虫注射Bmserpin2重组蛋白,检测Bmserpin2对其血淋巴中PPO活性的影响。通过滕黄微球菌Micrococcus luteus诱导家蚕5龄第3天幼虫产生抗菌肽并注射Bmserpin2重组蛋白后,RT-qPCR检测其血淋巴中抗菌肽基因gloverin2和moricin表达量。【结果】成功构建重组质粒并表达纯化目的蛋白Bmserpin2。通过与不同蛋白酶反应得出Bmserpin2可极显著抑制消化酶胰蛋白酶和弹性蛋白酶活性,对胰凝乳蛋白酶和蛋白酶K活性影响不显著,提示Bmserpin2对不同蛋白酶具有生物学活性和催化特异性。基因表达模式显示Bmserpin2在家蚕5龄幼虫血淋巴和脂肪体中表达量最高。家蚕5龄幼虫注射重组Bmserpin2蛋白后发现目的蛋白能有效抑制血淋巴中PPO活性。利用滕黄微球菌诱导家蚕5龄幼虫产生抗菌肽后,滕黄微球菌和Bmserpin2混合注射组中血淋巴中抗菌肽基因gloverin2和moricin的转录表达与只注射滕黄微球菌的比较被显著下调。【结论】Bmserpin2可能参与家蚕酚氧化酶原激活和TOLL途径的胞外级联反应的免疫通路。 展开更多
关键词 家蚕 自身免疫 丝氨酸蛋白酶抑制剂 酚氧化酶原 抗菌肽 TOLL通路
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桑黄菌丝体中多糖提取工艺优化及其体外抗氧化活性分析 认领 被引量:1
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作者 李瑞雪 王钰婷 +2 位作者 骆冬青 汪泰初 《中国农学通报》 2019年第29期143-150,共8页
为了研究桑黄菌丝体中桑黄多糖的提取工艺及其体外抗氧化活性,利用热水浸提法,在单因素实验结果的基础上,采用多因素正交试验对桑黄菌丝体中桑黄多糖的提取工艺进行优化,并通过检测桑黄多糖清除ABTS+·和DPPH·自由基的能力来... 为了研究桑黄菌丝体中桑黄多糖的提取工艺及其体外抗氧化活性,利用热水浸提法,在单因素实验结果的基础上,采用多因素正交试验对桑黄菌丝体中桑黄多糖的提取工艺进行优化,并通过检测桑黄多糖清除ABTS+·和DPPH·自由基的能力来评价其体外抗氧化活性。结果表明:桑黄多糖最佳提取工艺为:提取时间2.5 h,提取温度60℃,提取次数3次,液料比为14倍,在该最佳提取条件下桑黄多糖得率为4.97%;体外抗氧化活性实验结果表明,桑黄多糖的ABTS+·和DPPH·自由基清除能力有良好的剂量-效应关系,对ABTS+·和DPPH·的最高清除率分别为73.54%和88.83%。表明优化的桑黄液体发酵菌丝体中桑黄多糖提取工艺合理、可行,桑黄多糖有较强的体外抗氧化活性,可用于功能性食品和药剂的开发利用。 展开更多
关键词 桑黄 菌丝体 多糖 提取工艺 抗氧化活性
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夏秋用斑纹限性家蚕品种521B和523B的选育及皖·丰×夏·晖的组配 认领 被引量:2
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作者 石凉 +7 位作者 童晓琪 张彦 黄浩 张远祥 张世应 俞宗斌 黄德辉 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期544-550,共7页
根据家蚕斑纹限性遗传规律,采用杂交、连续回交及系统选择方法育成强健性中系斑纹限性夏秋用家蚕品种521B、523B,再将2个新品种与保育并改良的日系品种524、526组配成四元杂交组合皖·丰×夏·晖。新品种杂交组合不仅具有... 根据家蚕斑纹限性遗传规律,采用杂交、连续回交及系统选择方法育成强健性中系斑纹限性夏秋用家蚕品种521B、523B,再将2个新品种与保育并改良的日系品种524、526组配成四元杂交组合皖·丰×夏·晖。新品种杂交组合不仅具有强健好养、丝质优、繁育系数高的特点,而且可利用中系斑纹限性的表型,在幼虫5龄期准确鉴别雌雄,能有效降低蚕种繁育过程中的劳动强度,提高工效和蚕种的杂交率。新品种杂交组合在安徽省农村试养鉴定试验中,亦表现出孵化和发育齐一、食桑旺盛、强健好养、老熟齐涌、产茧量高、丝质优的特点,主要成绩为:虫蛹率98.44%,万蚕收茧量19.110 kg,茧层率21.02%,鲜毛茧出丝率16.22%,茧丝长1 124.4 m,解舒丝长899.3 m,解舒率79.77%,纤度2.983 dtex,洁净95.09分。皖·丰×夏·晖于2018年1月通过安徽省桑蚕品种审定委员会审定,适合在长江流域蚕区的夏季及中晚秋季节饲养。 展开更多
关键词 家蚕夏秋用品种 皖·丰×夏·晖 斑纹限性 强健性 丰产性 连续回交
桑树PDS基因VIGS转化体系的构建与鉴定 认领 被引量:2
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作者 李瑞雪 王钰婷 +3 位作者 胡飞 汪泰初 赵卫国 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期1432-1438,共7页
【目的】建立桑树的病毒诱导基因沉默(VIGS)转化体系,为桑树功能基因的分析研究提供技术支持。【方法】以丰驰桑为试验材料,克隆含BamHI和XbaI酶切位点的八氢番茄红素脱氢酶(PDS)基因片段,经XbaI和BamHI双酶切后与烟草脆裂病毒(TRV)连... 【目的】建立桑树的病毒诱导基因沉默(VIGS)转化体系,为桑树功能基因的分析研究提供技术支持。【方法】以丰驰桑为试验材料,克隆含BamHI和XbaI酶切位点的八氢番茄红素脱氢酶(PDS)基因片段,经XbaI和BamHI双酶切后与烟草脆裂病毒(TRV)连接构建重组病毒载体pTRV2-PDS,转化农杆菌GV3101后通过压迫注射方式侵染桑树幼苗叶片。【结果】克隆获得的桑树PDS基因干扰片段346bp,与改造后的TRV质粒连接可成功构建携带桑树PDS基因的重组病毒载体pTRV2-PDS。桑树叶片被侵染15d后,接种重组病毒载体pTRV2-PDS桑树的第二轮真叶开始出现叶片白化现象,侵染20d后,白化现象沿叶脉向四周逐渐扩散,叶片呈现明显的白化表型。实时荧光定量PCR检测结果显示,重组病毒载体pTRV2-PDS侵染的桑叶PDS基因相对表达量仅为阴性对照(pTRV2)的58%,二者差异极显著(P<0.01),表明桑树PDS基因表达被有效抑制。【结论】利用TRV构建的桑树VIGS体系能有效沉默PDS基因,使桑树叶片呈现明显的白化症状,即可用于后续的桑树功能基因鉴定。 展开更多
关键词 桑树 八氢番茄红素脱氢酶(PDS) 病毒诱导的基因沉默(VIGS) 烟草脆裂病毒(TRV) 白化表型
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3种黑木耳营养成分比较分析 认领 被引量:8
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作者 李瑞雪 汪泰初 +3 位作者 王钰婷 王伟 范涛 《农学学报》 2018年第3期48-52,共5页
为提供营养全面、质量安全的桑枝黑木耳,合理利用桑树伐条修剪产生的大量废弃枝条,提高黑木耳产品质量安全,促进食用菌及蚕桑产业的健康多元化发展,参照食用菌等食品国家标准方法对桑枝黑木耳与野生柞树黑木耳和市场普通黑木耳的常规营... 为提供营养全面、质量安全的桑枝黑木耳,合理利用桑树伐条修剪产生的大量废弃枝条,提高黑木耳产品质量安全,促进食用菌及蚕桑产业的健康多元化发展,参照食用菌等食品国家标准方法对桑枝黑木耳与野生柞树黑木耳和市场普通黑木耳的常规营养成分、氨基酸、矿物质含量和重金属含量等进行比较分析。结果表明,桑枝黑木耳中粗蛋白、总糖含量均高于野生柞树黑木耳和普通黑木耳;粗脂肪、粗纤维含量低于野生柞树黑木耳和普通黑木耳;桑枝黑木耳中富含17种氨基酸,包括8种人体必需氨基酸中的7种,总氨基酸含量高达10.51%;桑枝黑木耳中硒含量较高,为0.17 mg/kg,符合富硒食用菌的硒含量标准;铅、汞、镉、砷等重金属含量非常低,完全复合食品食用安全规定。桑枝黑木耳具有很好的营养膳食结构组合,是很有开发前景的富硒食用菌;用桑枝屑栽培黑木耳等食用菌,对蚕桑产业的可循环发展、保护生态环境促进食用菌产业发展均具有积极意义。 展开更多
关键词 黑木耳 桑枝 营养成分 比较分析
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桑树的经济价值及其在生态保护中的应用 认领 被引量:2
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作者 王钰婷 李瑞雪 +1 位作者 汪泰初 《中国市场》 2017年第11期239-240,共2页
随着经济社会的发展,人们已认识到桑树除了传统的为养蚕业提供饲料外,亦是一种兼具经济效益和生态效益的树种。文章综述了桑树资源的经济价值,探讨了其在生态环境保护中的应用,以期为进一步拓展桑树资源的综合利用提供重要参考依据。
关键词 桑树资源 经济价值 生态效益
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利用风味蛋白酶制备蚕蛹蛋白多肽的工艺研究 认领 被引量:4
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作者 李兴 李冰 +2 位作者 刘健 范涛 《中国蚕业》 2017年第2期12-16,20共6页
蚕蛹蛋白是一种优质蛋白资源,蚕蛹蛋白多肽分子量更小,可广泛应用于食品、保健品。以裸蛹家蚕一代杂交种的新鲜、无污染的蚕蛹为研究基础材料,通过有机溶剂提取的方法脱脂后得到蚕蛹粗蛋白,选择市场价格低廉、反应条件温和、酶解产物品... 蚕蛹蛋白是一种优质蛋白资源,蚕蛹蛋白多肽分子量更小,可广泛应用于食品、保健品。以裸蛹家蚕一代杂交种的新鲜、无污染的蚕蛹为研究基础材料,通过有机溶剂提取的方法脱脂后得到蚕蛹粗蛋白,选择市场价格低廉、反应条件温和、酶解产物品质高的风味蛋白酶酶解蚕蛹蛋白,制备蚕蛹蛋白多肽。通过单因素和正交试验确定了蚕蛹蛋白酶解制备蚕蛹蛋白多肽的最佳工艺条件:酶解温度50℃,酶解时间4h,料液质量浓度111g/L,酶解液pH值6.0,酶用量750U/g,此条件下水解度(DH)达到30.12%。 展开更多
关键词 蚕蛹 蛋白多肽 风味蛋白酶 酶解 工艺优化
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桑叶总黄酮提取工艺优化及其抗氧化活性分析 认领 被引量:2
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作者 李瑞雪 王钰婷 +2 位作者 王伟 汪泰初 《北方蚕业》 2017年第4期4-11,共8页
以桑叶总黄酮提取率为检测指标,通过单因素筛选及正交试验对桑叶总黄酮提取工艺进行了优化;并通过检测分析桑叶总黄酮清除ABTS^+·和DPPH·自由基能力来研究不同桑树品种的桑叶总黄酮体外总抗氧化活性。研究结果显示:桑叶总... 以桑叶总黄酮提取率为检测指标,通过单因素筛选及正交试验对桑叶总黄酮提取工艺进行了优化;并通过检测分析桑叶总黄酮清除ABTS^+·和DPPH·自由基能力来研究不同桑树品种的桑叶总黄酮体外总抗氧化活性。研究结果显示:桑叶总黄酮的最佳提取工艺为:提取时间120min,提取溶剂乙醇质量分数70%,料液质量浓度30g/L,提取温度80℃,优化后的桑叶总黄酮提取率达到33.97mg/g;不同桑品种的桑叶总黄酮提取液均对自由基ABTS^+·和DPPH·有清除能力,但不同品种间的清除率有极显著差异(P〈0.01),其中昌盛、湘桑7920、佛堂瓦桑、鲁插1号有较强的ABTS+·清除能力,清除率在90%以上,皖桑2号、鲁插1号、湖桑199有较强的DPPH·清除能力,清除率在90%以上,表明桑叶总黄酮可作为一种良好的天然抗氧化剂来源。 展开更多
关键词 桑叶 总黄酮 正交分析 提取工艺 抗氧化活性
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RNA-Seq技术在桑葚糖代谢中的应用价值探究 认领
9
作者 王钰婷 李瑞雪 +1 位作者 汪泰初 《产业与科技论坛》 2017年第8期77-78,共2页
桑葚含有丰富的营养物质和功能成分,具有良好的开发利用前景,选育高品质的果桑已成为研究热点。糖代谢是整个生物代谢的中心,与果实的发育及产量密切相关,对桑葚糖代谢调控机理的研究具有重要的理论与实践意义。本文对RNA-Seq技术在桑... 桑葚含有丰富的营养物质和功能成分,具有良好的开发利用前景,选育高品质的果桑已成为研究热点。糖代谢是整个生物代谢的中心,与果实的发育及产量密切相关,对桑葚糖代谢调控机理的研究具有重要的理论与实践意义。本文对RNA-Seq技术在桑葚糖代谢中的应用价值进行综述,以期为进一步通过育种手段实现桑葚增量和有效成分含量的提高提供理论依据。 展开更多
关键词 桑葚 RNA-SEQ 糖代谢 基因表达
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安徽省蓖麻蚕发展前景分析 认领
10
作者 赵萍 陈远平 +2 位作者 丁绍梅 吴传华 《现代农业科技》 2016年第24期255-256,共2页
根据安徽省蓖麻蚕养殖的历史、安徽省的气候、地理特征和蓖麻蚕试养结果,分析了安徽省发展蓖麻蚕的可行性,提出了蓖麻蚕在安徽省的发展建议。
关键词 蓖麻蚕 可行性 前景 发展建议 安徽省
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安徽省发展柞蚕业的可行性探讨 认领
11
作者 赵萍 陈远平 +3 位作者 丁绍梅 吴传华 陈怀玉 《北方蚕业》 2016年第4期51-54,共4页
对安徽省柞蚕养殖的历史、安徽省的气候、地形特征、栎树资源的分布进行调研,分析安徽省发展柞蚕业的机遇与问题,并通过近两年的柞蚕放养试点,探讨安徽省发展柞蚕业的可行性,提出发展安徽柞蚕业的意见和建议。
关键词 安徽省 柞蚕 可行性 发展意见
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气候变化影响环境和健康的现状及对策 认领
12
作者 《现代农业科技》 2009年第17期 283,286,共2页
气候变化对环境与健康的影响日益受到关注,阐述了气候变化影响环境和健康的现状,分析其原因,并提出了相应的对策。
关键词 气候变化 环境 健康 现状 原因 对策
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行政事业单位内部控制探讨 认领 被引量:3
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作者 《现代农业科技》 2009年第16期 385,387,共2页
阐述了实施内部控制制度的必要性,分析了行政事业单位内部控制存在的问题,并提出了相应的措施与对策。
关键词 内部控制 行政事业单位 财务制度
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农业科研项目审计中的问题及对策 认领
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作者 赵萍 丁本金 《经济视野》 2014年第23期287-287,共1页
随着经济的发展,农业科研单位的规模不断地扩大,经营方式呈现出多样化,管理的层次也更加明晰.在农业科研项目中,相关的经费管理存在着较多的问题.本文将对农业科研项目审计中的问题进行分析,提出了建立预算监督体系、加强业务培训等有... 随着经济的发展,农业科研单位的规模不断地扩大,经营方式呈现出多样化,管理的层次也更加明晰.在农业科研项目中,相关的经费管理存在着较多的问题.本文将对农业科研项目审计中的问题进行分析,提出了建立预算监督体系、加强业务培训等有效的对策,希望能加强对农业科研项目中经费的管理. 展开更多
关键词 农业科研项目 内部审计 有效对策
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