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维生素D介导鸡BMSCs和BMMs共培养体系中破骨细胞的形成 预览
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作者 顾建红 闵雯嫣 +5 位作者 周佳 赵玉田 卞建春 刘学忠 袁燕 刘宗平 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1509-1517,共9页
为探究1α, 25-(OH)2D3对鸡骨髓间充质干细胞(BMSCs)和骨髓单核巨噬细胞(BMMs)体外共培养体系中破骨细胞(OC)形成的影响,笔者对1α, 25-(OH)2D3处理后的细胞进行抗酒石酸酸性磷酸酶染色(TRAP)、骨吸收功能鉴定、OC标志基因mRNA和蛋白表... 为探究1α, 25-(OH)2D3对鸡骨髓间充质干细胞(BMSCs)和骨髓单核巨噬细胞(BMMs)体外共培养体系中破骨细胞(OC)形成的影响,笔者对1α, 25-(OH)2D3处理后的细胞进行抗酒石酸酸性磷酸酶染色(TRAP)、骨吸收功能鉴定、OC标志基因mRNA和蛋白表达的检测。结果表明:1α, 25-(OH)2D3能够上调BMSCs中核因子κB受体活化因子配体(RANKL)的表达,下调骨保护素(OPG)的表达。1α, 25-(OH)2D3处理共培养细胞5 d,OC数目较对照组明显增多,骨吸收活性较对照组极显著增强,基质金属蛋白酶9(MMP-9)、Ⅱ型碳酸酐酶(CAⅡ)、组织蛋白酶K(CtsK)及TRAP等标志性蛋白的mRNA和蛋白表达极显著高于对照组(P<0.01),其中10-8 mol·L^-1 1α, 25-(OH)2D3效果最明显。结果表明,10-8 mol·L^-1 1α, 25-(OH)2D3能够介导鸡BMSCs和BMMs共培养体系中OC的形成,该OC具有骨吸收活性,为进一步研究OC在家禽骨骼及钙磷代谢紊乱性疾病中的作用机制奠定基础。 展开更多
关键词 SPF鸡胚 25-(OH)2D3 骨髓间充质干细胞 破骨细胞 骨吸收
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鸡胚成骨细胞分离培养方法的建立
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作者 闵雯嫣 周佳 +5 位作者 张雨蓓 张松彬 卞建春 袁燕 顾建红 刘宗平 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2392-2397,共6页
为了寻找一种可以获得大量高纯度、活力强的鸡胚成骨细胞(osteoblast,OB)的分离培养方法,利用胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶2次消化法分离18日龄鸡胚颅盖骨细胞。CCK-8法、台盼蓝染色对其进行增殖和活性鉴定;碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,A... 为了寻找一种可以获得大量高纯度、活力强的鸡胚成骨细胞(osteoblast,OB)的分离培养方法,利用胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶2次消化法分离18日龄鸡胚颅盖骨细胞。CCK-8法、台盼蓝染色对其进行增殖和活性鉴定;碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和茜素红染色(alizarin red staining)对其进行特异性染色鉴定;实时荧光定量PCR扩增检测鸡胚OB标志性基因Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)、ALP、成骨细胞特异性转录因子(osteoblast specific transcription factor,OSX)mRNA的表达。结果显示,分离的细胞活性较强,具有良好的增殖能力,ALP和茜素红染色均呈强阳性,能高表达ALP、Runx2、OSX基因;表明所分离的颅盖骨细胞具有OB特性,活性强,纯度高,为进一步探讨家禽骨骼疾病的发生及防控机制奠定基础。 展开更多
关键词 鸡胚 成骨细胞 茜素红 Runt相关转录因子2(Runx2) 成骨细胞特异性转录因子(OSX)
校园欺凌产生的原因及应对策略研究 预览 被引量:3
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作者 周佳 《亚太教育》 2016年第29期103-103,93共2页
近年来,有关校园欺凌的报道越来越多,这已经成为了一个严重的社会问题,欺凌事件的发生会严重影响青少年的健康成长。校园欺凌事件为何频发,我们应如何制止以及预防欺凌的发生,这是一个需要我们认真思考的问题。本文从校园欺凌入手,对校... 近年来,有关校园欺凌的报道越来越多,这已经成为了一个严重的社会问题,欺凌事件的发生会严重影响青少年的健康成长。校园欺凌事件为何频发,我们应如何制止以及预防欺凌的发生,这是一个需要我们认真思考的问题。本文从校园欺凌入手,对校园欺凌进行概述,找出发生欺凌事件的原因以及应对策略。以期提出一些可操作性的手段来改善这种状况。 展开更多
关键词 校园欺凌 学生 应对策略
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鸡胚原代软骨细胞的分离培养及表型鉴定
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作者 李赛慧 周佳 +5 位作者 张雨蓓 张松彬 卞建春 袁燕 刘宗平 顾建红 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期349-354,共6页
选取不同日龄的SPF鸡胚进行骨架染色,确定软骨最佳取材日龄为15日龄,分离关节软骨,采用胰蛋白酶和Ⅳ型胶原酶两步消化法获取软骨细胞。CCK-8法检测细胞增殖率,阿利新蓝染色及实时荧光定量PCR技术检测软骨细胞标志性基因表达来鉴定分离... 选取不同日龄的SPF鸡胚进行骨架染色,确定软骨最佳取材日龄为15日龄,分离关节软骨,采用胰蛋白酶和Ⅳ型胶原酶两步消化法获取软骨细胞。CCK-8法检测细胞增殖率,阿利新蓝染色及实时荧光定量PCR技术检测软骨细胞标志性基因表达来鉴定分离培养的软骨细胞。结果显示,分离培养的软骨细胞3~5 d时增殖较快,阿利新蓝染色阳性,能够表达sox9、colⅡ、acan、vegfA和mmp13等不同分化阶段标志性基因,且随着体外培养时间的增加,晚期表达基因vegfA和mmp13 mRNA表达上调。结果表明,分离培养的鸡胚软骨细胞具有软骨细胞表型,可作为家禽骨骼及钙磷代谢紊乱性疾病研究模型。本试验旨在建立鸡胚原代软骨细胞的体外培养体系,以期为家禽骨骼及钙磷代谢紊乱性疾病研究提供理论依据。 展开更多
关键词 鸡胚原代软骨细胞 骨架染色 阿利新蓝 Ⅱ型胶原 基质金属蛋白酶13
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