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一线抗痨药物均耐药结核菌体外组合药物作用效果研究 预览
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作者 王易伟 胡频频 +4 位作者 张西雁 王宇 钟静 钟敏 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第14期 1762-1763,1766,共3页
目的对临床主要一线抗痨药异烟肼(isoniazidum,H)、利福平(rifampin,R)、链霉素(streptomycin,S)和乙胺丁醇(ethambatal,E)均耐药结核菌株进行体外组合药物作用效果研究,拟探讨结核病主要一线药物均耐药再联合用药时,化... 目的对临床主要一线抗痨药异烟肼(isoniazidum,H)、利福平(rifampin,R)、链霉素(streptomycin,S)和乙胺丁醇(ethambatal,E)均耐药结核菌株进行体外组合药物作用效果研究,拟探讨结核病主要一线药物均耐药再联合用药时,化疗是否有效的临床耐多药结核病治疗问题。方法采用BacT/ALERT3D分支杆菌培养系统对10株常规L-J法药敏至少对H、R、S和E(或同时对R)依赖的结核菌株及H37Rv标准敏感菌株,以MIC和平均血药峰浓度分别进行H、R、S及E单一药物和H+E+S及H+S+E+R组合药物药敏平行实验;将3D培养42d结果为阴性的实验瓶混悬液再平行转种于L-J管继续培养,以确定药物作用的效果(观察细菌是否真正被药物杀死)。结果单一药物3D法与L-J法的药敏结果基本一致。3D法单一药物均耐药菌株组合药物MIC和平均血药峰浓度实验结果显示不同程度报告阳性时间延长趋势。3D法单一药物耐药,组合药物未报告阳性的实验瓶,转种于L-J管继续培养均报告阳性。病例追踪10株分离株均为一线正规化疗失败的复治肺结核患者。结论小样本菌株实验研究结果提示:体外3D法H、R、S及E单一药物均耐药的临床结核菌株,组合药物(MIC和平均血药峰浓度)对其细菌可有不同程度的相对抑制作用,但没有最终协同杀灭细菌,其实验结果与患者临床疗效相符合。 展开更多
关键词 分支杆菌 结核 3D分支杆菌培养系统 组合药敏实验 耐多药结核病
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依赖利福平结核分枝杆菌相关蛋白的氨基酸及其编码基因序列研究 被引量:10
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作者 钟敏 王易伟 +4 位作者 胡频频 钟静 胡忠义 罗永艾 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期 83-86,共4页
目的 研究临床依赖利福平结核分枝杆菌(依R菌)相关蛋白的氨基酸及其编码基因序列。方法以罗氏绝对浓度法药敏实验鉴定临床依R菌株(49株)、耐R菌株(54株)和R敏感菌株(30株),用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺电泳(SDS-PAGE)法对不... 目的 研究临床依赖利福平结核分枝杆菌(依R菌)相关蛋白的氨基酸及其编码基因序列。方法以罗氏绝对浓度法药敏实验鉴定临床依R菌株(49株)、耐R菌株(54株)和R敏感菌株(30株),用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺电泳(SDS-PAGE)法对不同临床菌株及H37Rv标准株共计134株菌株的菌体蛋白质图谱进行比较分析,通过Q-TOF2型毛细管液相色谱-电喷雾-四极杆-飞行时间串联质谱仪(LC-ESI-MS-MS)对其差异表达蛋白的氨基酸序列进行鉴定,并用对其蛋白的编码基因进行DNA序列分析。结果不同菌株的SDS-PAGE菌体蛋白图谱基本相似。49株依R菌有4l株(84%)在含R管中的菌体蛋白图谱有一条相同的高表达蛋白带(相对于标准物分子质量43000的下端),约占总菌体蛋白的30%~50%,H37Rv标准株、28株R敏感菌(28/30)及44株耐R菌(44/54)的含R管和对照管的蛋白图谱相似,且无相应的高表达现象;该高表达蛋白经氨基酸序列鉴定为结核分枝杆菌H37Rv假设蛋白Rv0341,相对分子质量为43894,等电点(PI)5.25,得分183。不同菌株的Rv0341编码基因1440bp扩增片段,经DNA测序分析均未发现突变。结论利福平对Rv0341在依R菌中的表达有上调作用,Rv0341与依R菌相关,可视为依R菌的相关蛋白或标志物;Rv0341与依R菌的毒力及细胞壁的合成是否相关有进一步的研究价值。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 利福平 蛋白质组 基因
树突状细胞在抗结核分枝杆菌感染中的作用 预览
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作者 杨燕萍 +1 位作者 谢建平 王洪海 《科技导报》 CAS CSCD 2005年第12期 47-49,共3页
树突状细胞(Dendritic cells,DCs)是最有效的抗原呈递细胞.DCs能够摄取外来物质,包括结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB),并将其呈递给效应性淋巴细胞,激发宿主对抗病原微生物感染的免疫反应.因此,树突状细胞与结核分枝杆菌... 树突状细胞(Dendritic cells,DCs)是最有效的抗原呈递细胞.DCs能够摄取外来物质,包括结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB),并将其呈递给效应性淋巴细胞,激发宿主对抗病原微生物感染的免疫反应.因此,树突状细胞与结核分枝杆菌的相互作用在感染初期机体发动免疫应答中十分重要.研究树突状细胞和结核分枝杆菌间的相互作用,有利于从根本上了解细菌-宿主作用机理,为阐明结核分枝杆菌逃避免疫的机制提供依据. 展开更多
关键词 树突状细胞 结核分枝杆菌 免疫应答
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结核分枝杆菌感染人源树突状细胞的蛋白质表达谱 预览 被引量:4
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作者 乐军 +4 位作者 田野苹 杨燕萍 王洪海 刘丽蓉 闵彦 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期 415-419,共5页
在结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)的感染中,树突状细胞(Dendritic cells,DCs)的应答反应是机体起始免疫应答的关键.因此,利用双向电泳技术(Two-dimensional electrophoresis,2-DE)对人源树突状细胞受结核分枝杆菌H37Rv A... 在结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)的感染中,树突状细胞(Dendritic cells,DCs)的应答反应是机体起始免疫应答的关键.因此,利用双向电泳技术(Two-dimensional electrophoresis,2-DE)对人源树突状细胞受结核分枝杆菌H37Rv ATCC 27294菌株感染前后的全细胞蛋白表达图谱进行差异比较和分析,发现其中产生差异的有45个蛋白质斑点,利用基质辅助激光解析/电离串联飞行时间质谱技术对其中4个表达明显上调的蛋白质斑点进行分析鉴定,获得4个明确的肽指纹图谱,通过在数据库中检索分析,确定这4个蛋白质分别为人亚砷酸诱导ATP酶Ⅰ(Human Arsenite-stimulated ATPase,hASNA-I),膜联蛋白Ⅳ(Annexin Ⅳ),γ-肌动蛋白(γ-actin),热休克蛋白27(Heat shck protein27,HSP27).上述发现有助于了解结核分枝杆菌入侵早期导致的树突状细胞蛋白质组表达变化,为深入研究结核分枝杆菌-宿主相互作用提供了探索方向. 展开更多
关键词 树突状细胞 结核分枝杆菌 蛋白质组 差异表达 双向电泳
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重庆地区取食高粱的草地贪夜蛾与玉米粘虫肠道细菌比较
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作者 顾偌铖 唐运林 +13 位作者 吴燕燕 牛小慧 李青晏 郭志斌 向丽 蒋睿轩 雷云飞 刘秀 胡源 李田 韦俊宏 潘国庆 周泽扬 《西南大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期6-13,共8页
草地贪夜蛾( Spodoptera frugiperda )于2019年5月被发现已经入侵至重庆地区, 6月底在江津地区的高粱地中也发现了少量的草地贪夜蛾,同时还发现了大量玉米粘虫( Mythimna seperata ).通过分离培养同一生境内的草地贪夜蛾和玉米粘虫的肠... 草地贪夜蛾( Spodoptera frugiperda )于2019年5月被发现已经入侵至重庆地区, 6月底在江津地区的高粱地中也发现了少量的草地贪夜蛾,同时还发现了大量玉米粘虫( Mythimna seperata ).通过分离培养同一生境内的草地贪夜蛾和玉米粘虫的肠道细菌,结合16S rDNA测序完成了这两种害虫肠道优势菌属水平的鉴定,共分离得到了19个细菌分离株,其中分离自草地贪夜蛾肠道细菌归为5个属,分别为欧文氏菌属(Erwinia),不动杆菌属(Acinetobacter),肠杆菌属(Enterobacter),肠球菌属(Enterococcus),假单胞菌属(Pseudomonas).分离自玉米粘虫肠道细菌归为6个属,分别为克雷伯氏菌属(Klebsiella),不动杆菌属(Acinetobacter),寡养单胞菌属(Stenotrophomonas),肠球菌属(Enterococcus),金黄杆菌属(Chryseobacterium),芽孢杆菌属(Bacillus).同时我们也对采自玉米地和高粱地的草地贪夜蛾肠道微生物优势菌进行了比较分析,在江津高粱地中的草地贪夜蛾中没有发现克雷伯氏菌,但该菌在巫山、巫溪玉米地的草地贪夜蛾中大量存在.结论为进一步研究草地贪夜蛾幼虫肠道核心微生物群奠定了基础. 展开更多
关键词 重庆地区 高粱 草地贪夜蛾 玉米粘虫 肠道细菌
重庆地区3株球孢白僵菌的分离鉴定
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作者 吴燕燕 唐运林 +7 位作者 顾偌铖 李恬恬 李田 李春峰 韦俊宏 潘国庆 周泽扬 《西南大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期14-19,共6页
我国是农业和林业大国,农林害虫的危害造成了严重的经济损失,同时化学防治也导致了环境污染等诸多问题.因此,开发基于虫生真菌的生物农药意义重大.为了丰富虫生真菌菌种资源,以野外感染白僵菌的蝽蟓及室内感染的家蚕僵虫样品为实验材料... 我国是农业和林业大国,农林害虫的危害造成了严重的经济损失,同时化学防治也导致了环境污染等诸多问题.因此,开发基于虫生真菌的生物农药意义重大.为了丰富虫生真菌菌种资源,以野外感染白僵菌的蝽蟓及室内感染的家蚕僵虫样品为实验材料,采用多种培养基,分离获得了3株虫生真菌菌株,分别为来自蝽蟓的NB-1,PW-1菌株和来自家蚕的JCY菌株,形态学观察结果表明,各菌株的培养特征与白僵菌属菌株较为一致;分子生物学鉴定表明,各菌株rDNA ITS序列与GenBank中白僵菌属球孢白僵菌多个菌株同源性高达99%,因此将菌株NB-1,PW-1和JCY均鉴定为球孢白僵菌( Beauveria bassiana );生物学特性观察发现不同菌株间分生孢子产生量存在显著差异,分离自蝽蟓僵虫的球孢白僵菌PW-1,NB-1分生孢子产量分别为(7.55±0.15)×10^7个/mL,(6.30±0.40)×10^7个/mL,均高于家蚕分离株JCY,其产孢量仅为(3.02±0.22)×10^7个/mL.结论为后续研发针对包括草地贪夜蛾在内的农林害虫生物杀虫剂奠定了菌种基础. 展开更多
关键词 球孢白僵菌 虫生真菌 鉴定 蝽蟓 家蚕
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