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α1(I)型前胶原基因反义寡聚脱氧核苷酸对人增生性瘢痕成纤维细胞生物学特性的影响 被引量:2
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作者 邢帮荣 +2 位作者 谢举临 徐盈斌 祁少海 《中国美容整形外科杂志》 CAS 2013年第3期152-156,共5页
目的探讨应用α1(I)型前胶原基因反义寡聚脱氧核苷酸对增生性瘢痕成纤维细胞生长、胶原合成等生物学特性的影响。方法根据转染液分3组,实验组为脂质体加α1(I)型前胶原基因反义寡聚脱氧核苷酸;对照组1为脂质体组;对照组2为培养... 目的探讨应用α1(I)型前胶原基因反义寡聚脱氧核苷酸对增生性瘢痕成纤维细胞生长、胶原合成等生物学特性的影响。方法根据转染液分3组,实验组为脂质体加α1(I)型前胶原基因反义寡聚脱氧核苷酸;对照组1为脂质体组;对照组2为培养基空白对照组。用脂质体法将α1(I)型前胶原基因反义寡聚脱氧核苷酸转染增生陛髓魔成纤维细胞并运细胞计数法绘制细胞生长曲线;电子透射电镜观察转染后各组ttF超微结构的变化;转染后0.5、1、3、5、7d分别提取各组细胞总RNA,行RT-PCR后测定各组I胶原mRNA表达量;Western.bloring法检测转染后各组琏!胶原蛋白的变化。结果①反义寡聚脱氧核苷酸对增生陛瘢痕成纤维细胞生长增殖无抑制;②实验组增生l生瘢痕成纤维细胞蛋白合成的细胞器呈非活跃状态;③与对照组比较,实验组HF的a。(I)型前胶原蛋白mRNA的表达和例胶原合成量明显减少。结论α1(I)型前胶原基因反义寡聚脱氧核苷酸能抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的α1(I)型前胶原蛋白mRNA的表达和理I胶原蛋白的合成,提示可能抑制瘢痕增生。 展开更多
关键词 增生性瘢痕 成纤维细胞 I型胶原蛋白 反义寡聚脱氧核苷酸
胞间黏附分子1在妊娠合并烧伤大鼠血清及胎盘中的表达
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作者 徐丽南 林楠 +4 位作者 谢举临 张颖 蔡坚 王子莲 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期 70-72,共3页
妊娠合并烧伤可引起流产、死产,也可引发早产且新生儿病死率较高。烧伤引起的炎症反应可使胎盘功能发生一系列改变,其中胞间黏附分子1(ICAM-1)在炎症与胎盘功能改变中起重要介导作用。本研究探讨ICAM-1在妊娠合并烧伤大鼠病理生理... 妊娠合并烧伤可引起流产、死产,也可引发早产且新生儿病死率较高。烧伤引起的炎症反应可使胎盘功能发生一系列改变,其中胞间黏附分子1(ICAM-1)在炎症与胎盘功能改变中起重要介导作用。本研究探讨ICAM-1在妊娠合并烧伤大鼠病理生理变化过程中的作用,通过监测血清与胎盘组织中ICAM-1表达水平,分析其与胎盘功能的关系。 展开更多
关键词 胞间黏附分子1 胎盘功能 大鼠血清 烧伤 妊娠 ICAM-1表达 病理生理变化 炎症反应
荷负电气溶胶治疗对大鼠烫伤创面白细胞介素-8、10表达的影响及意义 被引量:3
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作者 徐盈斌 赵李平 +6 位作者 柯昌能 舒斌 唐锦明 谢举临 祁少海 刘旭盛 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期694-696,共3页
目的观察荷负电气溶胶治疗对大鼠烫伤创面愈合过程中白细胞介素(IL)-8、IL-10表达的影响,探讨荷负电气溶胶治疗促进创面愈合的作用机制。方法制作sD大鼠深Ⅱ度烫伤模型,采用分组对照方法,将40只鼠随机分为治疗组(n。=20)和对照组... 目的观察荷负电气溶胶治疗对大鼠烫伤创面愈合过程中白细胞介素(IL)-8、IL-10表达的影响,探讨荷负电气溶胶治疗促进创面愈合的作用机制。方法制作sD大鼠深Ⅱ度烫伤模型,采用分组对照方法,将40只鼠随机分为治疗组(n。=20)和对照组(n2=20)。治疗组应用荷负电气溶胶治疗,每次1.5h,每天2次,直至创面愈合;对照组不作荷负电气溶胶治疗。伤后第1-11天分别取创面标本制作切片,采用免疫组织化学和图像分析方法,检测创面愈合过程中IL-8和IL-10表达水平。结果创面平均愈合时间治疗组为(7.00±1.15)d,对照组为(9.00±1.34)d,治疗组创面愈合时间明显提前(P〈0.01)。免疫组织化学显示,两组IL-8均在伤后第1天开始表达,主要位于多核粒细胞和单核细胞;第3天表达明显增多达高峰,并见大量成纤维细胞表达,治疗组的峰值明显低于对照组,差异有统计学意义(P〈0.01),第5—11天表达水平迅速下降。两组IL-10伤后第1天在淋巴细胞和单核细胞均有表达;第3天开始有角质细胞表达并达高峰,第511天表达水平缓慢下降,但治疗组要明显高于对照组,第3-11天差异有统计学意义(P〈0.01)。结论荷负电气溶胶治疗能有效抑制创面IL-8的表达及促进IL-10的表达,缩短炎症进程,从而加速创面愈合。 展开更多
关键词 气溶胶 烧伤 创面愈合 白细胞介素
人Ⅰ型前胶原基因反义寡核苷酸对人增生性瘢痕裸鼠移植模型胶原合成的作用 被引量:2
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作者 袁即山 祁少海 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期718-723,共6页
目的人Ⅰ型前胶原基因(ColⅠA1)反义寡核苷酸(antisense oligodeoxyneucleotide,ASODN)对体外培养的人增生性瘢痕成纤维细胞有抑制胶原合成作用,拟进一步探讨ColⅠA1 ASODN对裸鼠移植模型体内的人增生性瘢痕的胶原合成作用。方法 SP... 目的人Ⅰ型前胶原基因(ColⅠA1)反义寡核苷酸(antisense oligodeoxyneucleotide,ASODN)对体外培养的人增生性瘢痕成纤维细胞有抑制胶原合成作用,拟进一步探讨ColⅠA1 ASODN对裸鼠移植模型体内的人增生性瘢痕的胶原合成作用。方法 SPF级BALB/c-nunu品系6~8周龄雌性裸鼠60只,体重约20 g;取行瘢痕切除手术患者自愿捐赠的瘢痕组织块去表皮后,移植至裸鼠背部肩胛内侧皮下,每只裸鼠移植1块,制备人增生性瘢痕裸鼠移植模型。将58只成功制备模型的裸鼠根据处理方法不同,随机分成3组,于瘢痕移植2周根据分组行经皮穿刺瘢痕内注射。A组(n=20):5μL浓度为3 mmol/L ColⅠA1 ASODN、3μL脂质体、92μL Opti-MEMⅠ减血清培养基;B组(n=20):3μL脂质体、97μL Opti-MEMⅠ减血清培养基;C组(n=18):100μL Opti-MEMⅠ减血清培养基。实验最初2周每天注射1次,之后隔天1次,至实验取材。注射后2、4、6周,对存活裸鼠进行瘢痕硬度测量后,处死裸鼠取瘢痕组织行胶原染色组织学观察以及透射电镜观察;提取细胞总RNA后行RT-PCR测定ColⅠA1 mRNA相对含量;ELISA法行ColⅠA1蛋白定量分析。结果注射后6周内17只裸鼠死亡;共41只裸鼠40块瘢痕组织符合实验标准,纳入实验;A、B、C组各14、13、14只。注射后2周,3组间瘢痕硬度比较,差异均无统计学意义(P〉0.05);4、6周时A组与B、C组比较,差异有统计学意义(P〈0.05),B、C组间比较差异无统计学意义(P〉0.05)。随时间延长,组织学观察示3组Ⅲ型胶原表达上升,A组最明显,Ⅰ型胶原排列规则。透射电镜观察示A组成纤维细胞退化,胶原纤维排列更趋于一致;B、C组胶原纤维排列也逐渐规则。注射后2、4周3组间ColⅠA1 mRNA和蛋白表达量比较,差异均有统计学意义(P〈0.05);6周时A组与B、C组比较,差异有统计学意义(P〈0.05),B、C组间比较差异无统计学意义(P〉0.05)。结论 � 展开更多
关键词 Ⅰ型前胶原基因 反义寡核苷酸 增生性瘢痕 胶原 裸鼠
碱性成纤维细胞生长因子与瘢痕成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的代谢 预览 被引量:4
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作者 谢举临 卞徽宁 +6 位作者 李厚东 舒斌 祁少海 唐锦明 徐盈斌 刘旭盛 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第41期 7657-7660,共4页
背景:研究证实碱性成纤维细胞生长因子有促进创面愈合的作用,然而其在促进创面愈合的同时是否会引起成纤维细胞的增殖而导致瘢痕增生已受到学者的广泛关注。目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子对瘢痕成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白合成和... 背景:研究证实碱性成纤维细胞生长因子有促进创面愈合的作用,然而其在促进创面愈合的同时是否会引起成纤维细胞的增殖而导致瘢痕增生已受到学者的广泛关注。目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子对瘢痕成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白合成和降解的调控作用。方法:增生性瘢痕组织取自中山大学附属第一医院烧伤科行瘢痕整复术的患者,组织块法培养瘢痕成纤维细胞。取第2代细胞,采用氯胺T法、RT-PCR和Westernblot法检测不同浓度(0~500μg/L)碱性成纤维细胞生长因子对瘢痕来源的成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及细胞基质金属蛋白酶1合成和分泌的影响。结果与结论:碱性成纤维细胞生长因子对瘢痕成纤维细胞羟脯氨酸及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA的表达均无促进作用。低质量浓度碱性成纤维细胞生长因子对细胞基质金属蛋白酶1的表达无明显影响,但随着质量浓度的升高表现为增高趋势,以50,100,500μg/L组增高最显著(P〈0.05或P〈0.01)。同时,细胞基质金属蛋白酶1的表达在细胞与上清中变化一致。说明高质量浓度碱性成纤维细胞生长因子可以通过增加细胞基质金属蛋白酶1的合成来促进胶原蛋白降解,从而避免细胞外基质的过度沉积。 展开更多
关键词 碱性成纤维细胞生长因子 成纤维细胞 细胞基质金属蛋白酶1 瘢痕 胶原蛋白
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碱性成纤维细胞生长因子对兔耳创面愈合过程中瘢痕形成的影响 被引量:3
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作者 谢举临 卞徼宁 +7 位作者 祁少海 徐盈斌 李厚东 成建定 刘旭盛 舒斌 唐锦明 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期298-300,409共4页
目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对兔耳瘢痕模型的影响作用。方法建立48个兔耳增生性瘢痕模型,将其随机分为bFGF治疗组与磷酸盐缓冲液(PBS)对照组,观察bFGF对创面愈合过程中瘢痕形成的影响。结果形态学分析结果显示治疗组3... 目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对兔耳瘢痕模型的影响作用。方法建立48个兔耳增生性瘢痕模型,将其随机分为bFGF治疗组与磷酸盐缓冲液(PBS)对照组,观察bFGF对创面愈合过程中瘢痕形成的影响。结果形态学分析结果显示治疗组3个月后瘢痕外观、厚度及质地均优于对照组,表现出良好的愈合质量;对照组羟脯氨酸(HPr)表达较高,且随时间表现为增高趋势,伤后3个月达到高峰;而bFGF治疗组HPr表达均有不同程度的下降;逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)结果显示bFGF可以抑制COⅠmRNA的表达,但对COⅢmRNA表达无明显影响;Westernblot结果显示bFGF可以促进MMP-1的合成,且随着时间延长表现为增高趋势,具有一定的时间相关性。结论bFGF可以通过增加MMP-1合成、促进胶原蛋白降解而减少瘢痕的形成。 展开更多
关键词 增生性瘢痕 碱性成纤维细胞生长因子 胶原蛋白
人I型前胶原基因反义寡核苷酸抑制增生性瘢痕成纤维细胞胶原合成 被引量:4
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作者 袁即山 祁少海 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期713-717,共5页
目的探讨阳离子脂质体介导I型前胶原基因(Col I A1)反义寡核苷酸(antisense oligodeoxyneucleotide,ASODN)转染对人增生性瘢痕成纤维细胞Col I A1表达的影响。方法取患者自愿捐赠瘢痕组织,采用组织块法培养人增生性瘢痕成纤维细... 目的探讨阳离子脂质体介导I型前胶原基因(Col I A1)反义寡核苷酸(antisense oligodeoxyneucleotide,ASODN)转染对人增生性瘢痕成纤维细胞Col I A1表达的影响。方法取患者自愿捐赠瘢痕组织,采用组织块法培养人增生性瘢痕成纤维细胞并传代。于6孔板内按32.25×10^4个/孔的密度接种第4代细胞,根据转染液不同分为4组:A组为脂质体加Col I A1 ASODN,B组为Col I A1 ASODN,C组为脂质体,D组为空白对照。转染后8h,1、2、3、4d分别提取细胞总RNA,行RT-PCR后测定Col I A1 mRNA表达量;胃酶消化法提取ECM中Col I A1蛋白,ELISA测定其浓度。结果扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测显示条带清晰,无杂带、明显的引物二聚体及拖尾现象。Col I A1 mRNA相对表达量:转染后8h,A组小于B、C、D组,B、C组小于D组,比较差异均有统计学意义(P〈0.05);B、C组间比较差异无统计学意义(P〉0.05);转染后1d,A、B组小于C、D组(P〈0.05),A、B组间和C、D组间比较差异无统计学意义(P〉0.05);转染后2d,各组间比较差异均有统计学意义(P〈0.05);转染后3、4d,A组小于B、C、D组,B组小于C、D组(P〈0.05),C、D组间差异无统计学意义(P〉0.05)。Col I蛋白浓度:转染后8h,A组小于B、C、D组,B、C组小于D组,比较差异均有统计学意义(P〈0.05),B、C组间差异无统计学意义(P〉0.05);转染后1d,各组间比较差异均有统计学意义(P〈0.05):转染后2、3、4d,A、B组小于C、D组,C组小于D组(P〈0.05),A、B组间差异无统计学意义(P〉0.05)。结论Col I A1 ASODN抑制Col I A1 mRNA和蛋白表达;阳离子脂质体作为载体有增强效果,促进ASODN进入细胞并在核内分布。 展开更多
关键词 I型前胶原基因 反义寡核苷酸 增生性瘢痕 胶原
严重烧伤后应激性溃疡的综合防治 预览 被引量:1
8
作者 谢举临 +5 位作者 祁少海 徐盈斌 李厚东 刘旭盛 舒斌 唐锦明 《中华损伤与修复杂志(电子版)》 CAS 2008年第5期 42-44,共3页
目的探讨严重烧伤后应激性溃疡的致病原因及防治方法。方法对1985年4月至2006年4月间收治的严重烧伤患者中并发应激性溃疡的38例患者临床资料进行回顾性分析。结果442例严重烧伤患者中,并发应激性溃疡者38例,发病率为8.6%;并发应... 目的探讨严重烧伤后应激性溃疡的致病原因及防治方法。方法对1985年4月至2006年4月间收治的严重烧伤患者中并发应激性溃疡的38例患者临床资料进行回顾性分析。结果442例严重烧伤患者中,并发应激性溃疡者38例,发病率为8.6%;并发应激性溃疡者38例中死亡13例,病死率为34.2%。结论严重烧伤后应激性溃疡的发生与休克、感染等应激因素有关,因此积极消除诱发因素、加强制酸、早期进食、保护胃黏膜、应用生长抑素、必要时手术治疗,同时加强创面处理和抗感染治疗是防治烧伤后应激性溃疡的有效方法。 展开更多
关键词 严重烧伤 应激性溃疡 治疗 出血
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人增生性瘢痕组织中肥大细胞分离的条件优化 预览
9
作者 赵李平 王明刚 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2008年第3期 354-355,共2页
目的探讨分离人增生性瘢痕组织中肥大细胞(MC)所用的Ⅰ型胶原酶和透明质酸酶的最佳浓度;获取MC,用于瘢痕瘙痒研究。方法用不同浓度的Ⅰ型胶原酶和透明质酸酶消化分离MC;甲苯胺蓝染色和番红复染,鉴定并计数MC。结果MC体积大、核呈... 目的探讨分离人增生性瘢痕组织中肥大细胞(MC)所用的Ⅰ型胶原酶和透明质酸酶的最佳浓度;获取MC,用于瘢痕瘙痒研究。方法用不同浓度的Ⅰ型胶原酶和透明质酸酶消化分离MC;甲苯胺蓝染色和番红复染,鉴定并计数MC。结果MC体积大、核呈蓝色,胞浆内含紫红色分泌颗粒。当透明质酸酶浓度为1mg/ml时,与Ⅰ型胶原酶浓度为1、2mg/ml组比较,Ⅰ型胶原酶浓度为3、4mg/ml组分离出的MC占有核细胞的百分比明显增加,差异均有显著性(P〈0,01);但3mg/ml组与4mg/ml组之间的差异不明显(P〉0,05)。当Ⅰ型胶原酶浓度为3mg/ml时,与透明质酸酶浓度为0.5mg/ml组比较,透明质酸酶浓度为1、2mg/ml组分离出的MC占有核细胞的百分比明显增加,差异均有显著性(P〈0,01);但1mg/ml与2mg/ml组之间的差异不明显(P〉0.05)。培养12h的细胞悬液中大部分黏附能力强的细胞已贴壁、溶解,而MC黏附性较差,轻轻摇动就可重新悬浮于培养液中。结论用Ⅰ型胶原酶和透质酸酶可以成功分离出人增生性瘢痕组织中的MC,最佳浓度分别为3、1mg/ml。分离的MC存活时间较长,可满足实验需求。 展开更多
关键词 瘢痕 肥大性 肥大细胞 细胞分离 瘙痒症 微生物胶原酶 透明质酸葡糖胺酶
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碱性成纤维细胞生长因子对培养的瘢痕成纤维细胞FN合成的调控作用 预览 被引量:2
10
作者 卞徽宁 谢举临 +3 位作者 祁少海 徐盈斌 刘旭盛 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2008年第1期 6-8,共3页
目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对成纤维细胞纤维连结蛋白(FN)合成的调控作用。方法采用细胞培养、ELISA法、RT-PCR方法观察bFGF在不同剂量下对瘢痕来源的成纤维细胞FN合成的影响。结果FN的表达在低bFGF浓度组与对照组无明... 目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对成纤维细胞纤维连结蛋白(FN)合成的调控作用。方法采用细胞培养、ELISA法、RT-PCR方法观察bFGF在不同剂量下对瘢痕来源的成纤维细胞FN合成的影响。结果FN的表达在低bFGF浓度组与对照组无明显差异,随着浓度的升高表现为增高趋势,以50、100、500ng/ml最显著,与对照组之间有显著性差异(P〈0.05)。FN mRNA表达在50-100ng/ml组明显升高,与对照组间有显著性差异(P〈0.05)。mRNA表达趋势与上清中蛋白的表达具有一致性。结论高浓度bFGF刺激FN合成可能是bFGF促进创面愈合的重要原因。 展开更多
关键词 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) 成纤维细胞 纤维连结蛋白(FN)
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P物质对人增生性瘢痕肥大细胞中刺激性G蛋白α亚基mRNA表达的影响 预览
11
作者 赵李平 +1 位作者 祁少海 徐盈斌 《安徽医学》 2008年第2期 97-99,共3页
目的 探讨P物质(SP)与增生性瘢痕瘙痒发生的关系及可能的机制。方法 Ⅰ型胶原酶和透明质酸酶消化分离肥大细胞,用荧光分光光度法检测G蛋白失活剂NEM对人增生性瘢痕、非增生性瘢痕以及皮肤中肥大细胞释放组胺的影响;RT-PCR法分析SP对... 目的 探讨P物质(SP)与增生性瘢痕瘙痒发生的关系及可能的机制。方法 Ⅰ型胶原酶和透明质酸酶消化分离肥大细胞,用荧光分光光度法检测G蛋白失活剂NEM对人增生性瘢痕、非增生性瘢痕以及皮肤中肥大细胞释放组胺的影响;RT-PCR法分析SP对刺激性G蛋白(Gs)α亚基mRNA表达的影响。结果 (1)与对照组比较,SP均明显增强三种组织中MCs分泌组胺的效应,而NEM对其效应有明显的抑制作用。(2)对照组中,GsαmRNA在上述三种组织中的表达差异无显著性;SP作用后,GsαmRNA在三种组织中的表达均明显增强,增生性瘢痕组与正常皮肤组和非增生性瘢痕组比较差异有显著性。结论 SP通过上调GsαmRNA在肥大细胞中的表达促进组胺的释放,这可能是增生性瘢痕瘙痒发生的机制之一。 展开更多
关键词 P物质 G蛋白 肥大细胞 组胺
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不同年龄人真皮多能干细胞的分离及体外分化特点 被引量:4
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作者 徐盈斌 柯昌能 +5 位作者 祁少海 黄冰 谢举临 赵李平 刘坡 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期 62-65,共4页
目的研究不同年龄人真皮多能干细胞的分离、鉴定及体外分化特点。方法切取胎儿、患儿、中青年患者、老年患者正常皮肤标本(1cm×1cm),采用干细胞培养基筛选原代细胞克隆并记录其数量和直径;检测各种标本来源细胞克隆的体外分化... 目的研究不同年龄人真皮多能干细胞的分离、鉴定及体外分化特点。方法切取胎儿、患儿、中青年患者、老年患者正常皮肤标本(1cm×1cm),采用干细胞培养基筛选原代细胞克隆并记录其数量和直径;检测各种标本来源细胞克隆的体外分化情况;行单个细胞克隆分化分析,并检测其相关蛋白的表达。结果胎儿、患儿、中青年患者、老年患者正常皮肤原代培养获得的细胞克隆数分别为(20.1±2.5)×10^2、(15.8±5.7)×10^2、(10.8±1.3)×10^2、(6.2±1.4)×10^2个,两两比较,差异有统计学意义(P<0.01);克隆直径分别为(83±12)、(55±10)、(46±12)、(42±8)μm,胎儿>患儿>中青年及老年患者(P<0.05)。各种细胞克隆均能向神经元细胞、神经胶质细胞、平滑肌细胞和脂肪细胞分化,其中胎儿来源的细胞克隆有向神经元细胞分化的优势。培养1个月,胎儿、患儿、中青年患者、老年患者单个细胞克隆形成率依次为41.1%、25.5%、17.7%、15.2%;单个细胞克隆亦能同上多向分化,同时表达巢蛋白、纤维连接蛋白、原癌基因c-mye、信号转导和转录激活因子3、端粒体逆转录酶。结论采用干细胞培养基能够有效分离不同年龄人真皮中具有克隆增殖和多向分化潜能的干细胞,年龄对其的数量、增殖和分化有明显影响。 展开更多
关键词 多能干细胞 真皮 细胞分离 细胞分化 年龄因素
碱性成纤维细胞生长因子对瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响 预览 被引量:3
13
作者 谢举临 卞辉宁 +2 位作者 祁少海 徐盈斌 《中华损伤与修复杂志(电子版)》 CAS 2007年第1期 26-29,共4页
目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对瘢痕成纤维细胞生物学特性的影响。方法采用细胞培养、MTT、ELISA法、氯胺T和RT—PCR法检测bFGF在不同作用剂量下对瘢痕来源的成纤维细胞生长增殖和细胞外基质(ECM)合成的影响。结果(1)MT... 目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对瘢痕成纤维细胞生物学特性的影响。方法采用细胞培养、MTT、ELISA法、氯胺T和RT—PCR法检测bFGF在不同作用剂量下对瘢痕来源的成纤维细胞生长增殖和细胞外基质(ECM)合成的影响。结果(1)MTT检测bFGF对瘢痕成纤维细胞有明确的促增殖作用,并具有剂量相关性;(2)氯胺T法显示实验组和对照组HPr含量无显著性差异,RT—PCR法显示各组Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达水平无明显变化;说明bFGF对瘢痕成纤维细胞胶原蛋白的合成无促进作用;(3)ELISA法表明随着bFGF作用浓度的升高,FN的表达表现为增高趋势,且以100ng/ml浓度下作用最显著。结论bFGF可以促进创面愈合,但不引起瘢痕的过度形成。 展开更多
关键词 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) 瘢痕成纤维细胞 细胞外基质(ECM)
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Gi-2αmRNA在人增生性瘢痕肥大细胞中表达及对组胺释放的影响 预览 被引量:2
14
作者 赵李平 +1 位作者 祁少海 徐盈斌 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2007年第5期 498-501,共4页
目的探讨G蛋白与增生性瘢痕瘙痒发生的关系及可能的机制。方法Ⅰ型胶原酶和透明质酸酶消化分离肥大细胞,用荧光分光光度法检测G蛋白失活剂NEM对人增生性瘢痕、非增生性瘢痕以及皮肤中肥大细胞释放组胺的影响;RT-PCR法分析P物质(SP)对G... 目的探讨G蛋白与增生性瘢痕瘙痒发生的关系及可能的机制。方法Ⅰ型胶原酶和透明质酸酶消化分离肥大细胞,用荧光分光光度法检测G蛋白失活剂NEM对人增生性瘢痕、非增生性瘢痕以及皮肤中肥大细胞释放组胺的影响;RT-PCR法分析P物质(SP)对Gi-2αmRNA表达的影响。结果①与对照组比较,SP均明显增强三种组织中肥大细胞分泌组胺的效应,而NEM对其效应有明显的抑制作用。②对照组中,增生性瘢痕肥大细胞中Gi-2αmRNA的表达明显弱于非增生性瘢痕和正常皮肤(P〈0.01);SP作用后,Gi-2αmRNA在三种组织中的表达与对照组比较差异无显著性。结论G蛋白介导了SP刺激人皮肤和瘢痕组织中肥大细胞分泌组胺的效应;Gi-2αmRNA的弱表达可能在增生性瘢痕瘙痒发生中起重要作用。 展开更多
关键词 P物质 GTP结合蛋白质类 肥大细胞 组胺 瘢痕
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严重腹部电烧伤临床分析 预览 被引量:2
15
作者 黄勇 祁少海 +4 位作者 何国 徐盈斌 谢举临 刘旭盛 《中华损伤与修复杂志(电子版)》 CAS 2007年第4期 202-204,共3页
目的探讨严重电烧伤全层腹壁及腹腔内脏器损伤的诊治方法。方法收集1992年3月至2006年4月5例严重腹部高压电烧伤采用皮瓣转移或植皮术进行修复的临床资料,对其进行回顾性分析。结果采用皮瓣转移或植皮术进行修复的5例患者,4例皮瓣全... 目的探讨严重电烧伤全层腹壁及腹腔内脏器损伤的诊治方法。方法收集1992年3月至2006年4月5例严重腹部高压电烧伤采用皮瓣转移或植皮术进行修复的临床资料,对其进行回顾性分析。结果采用皮瓣转移或植皮术进行修复的5例患者,4例皮瓣全部成活,其中3例皮瓣Ⅰ期愈合,1例皮瓣远端缺血坏死;1例术后3小时病情恶化抢救无效死亡。结论严重腹部电烧伤治疗的关键在于把握剖腹探查的时机和选择恰当的皮瓣。 展开更多
关键词 烧伤 皮瓣
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体外培养表皮干细胞构建组织工程皮肤的研究 被引量:6
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作者 谢举临 +3 位作者 祁少海 黄冰 陈系古 徐盈斌 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期 1533-1535,共3页
目的探讨应用表皮干细胞构建组织工程皮肤修复皮肤缺损的可行性。方法运用黏附实验将人表皮干细胞分选出来后大量培养,将成纤维细胞和表皮干细胞转移到真皮底物上构建组织工程皮肤,并将之移植于裸鼠皮肤缺损模型,于术后第1、2、4周... 目的探讨应用表皮干细胞构建组织工程皮肤修复皮肤缺损的可行性。方法运用黏附实验将人表皮干细胞分选出来后大量培养,将成纤维细胞和表皮干细胞转移到真皮底物上构建组织工程皮肤,并将之移植于裸鼠皮肤缺损模型,于术后第1、2、4周处死动物,收集标本,进行组织学、透射电镜及免疫组织化学检查。结果组织工程皮肤移植后4周具备完整的表皮层和真皮层,表皮层中具备基底层、棘层、颗粒层和角质层。表皮细胞间还可以看到有桥粒、半桥粒、角质透明颗粒和粗张力微丝柬。表、真皮层间有连续的、完整的基底膜。真皮网架破坏明显,大量的成纤维细胞增殖活跃,胶原纤维排列整齐,有丰富的毛细血管。结论本研究所构建的组织工程皮肤组织学形态和超微结构上已接近于正常的皮肤,从而为临床修复皮肤缺损的研究打下了坚实的理论和实践基础。 展开更多
关键词 表皮干细胞 组织工程 皮肤 皮肤缺损
胎儿毛乳头细胞分化为类成骨细胞的实验研究
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作者 祁少海 刘坡 +4 位作者 谢举临 徐盈斌 盛蹼义 舒斌 《中华显微外科杂志》 CSCD 北大核心 2006年第1期 39-41,i0003,共4页
目的 研究胎儿毛乳头细胞的体外成骨能力,为骨组织工程提供一种新的种子细胞。方法 Ⅰ型胶原酶消化法分离毛乳头,常规成纤维细胞培养液培养毛乳头细胞。第3代和第7代细胞经成骨诱导液诱导培养7d,以免疫荧光、Von Kossa等方法鉴定毛... 目的 研究胎儿毛乳头细胞的体外成骨能力,为骨组织工程提供一种新的种子细胞。方法 Ⅰ型胶原酶消化法分离毛乳头,常规成纤维细胞培养液培养毛乳头细胞。第3代和第7代细胞经成骨诱导液诱导培养7d,以免疫荧光、Von Kossa等方法鉴定毛乳头细胞及检测细胞的成骨特性。结果 培养的毛乳头细胞呈聚集性生长,表达平滑肌肌动蛋白和Ⅰ型胶原。经成骨诱导后表达骨桥蛋白,有钙结节形成。结论 毛乳头细胞具有成骨活性,可作为骨组织工程的种子细胞。 展开更多
关键词 毛乳头细胞 成骨性细胞 组织工程
磷酸化Smad2和Smad7在增生性瘢痕成纤维细胞中的表达
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作者 潘姝 +2 位作者 李叶扬 张涛 梁岷 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期 133-134,共2页
Smads蛋白家族是近年来发现的转化生长因子(TGF)-β1受体下游信号蛋白,也是目前公认的介导TGF-β1胞内反应的主要通路。笔者通过检测体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞(HSF)和正常皮肤成纤维细胞(NSF)中磷酸化Smad2和抑制性信号介... Smads蛋白家族是近年来发现的转化生长因子(TGF)-β1受体下游信号蛋白,也是目前公认的介导TGF-β1胞内反应的主要通路。笔者通过检测体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞(HSF)和正常皮肤成纤维细胞(NSF)中磷酸化Smad2和抑制性信号介导子Smad7的表达差异,拟探讨二者在增生性瘢痕发病机制中的作用。 展开更多
关键词 增生性瘢痕成纤维细胞 SMAD7 SMAD2 磷酸化 正常皮肤成纤维细胞 SMADS蛋白 转化生长因子 TGF-β1 信号介导 信号蛋白
乌司他丁对严重烧伤患者脏器功能的保护作用 预览 被引量:20
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作者 徐盈斌 祁少海 +6 位作者 谢举临 袁即山 张涛 陈晓东 舒斌 刘坡 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期 39-41,共3页
目的 探讨乌司他丁对严重烧伤患者脏器功能的作用。方法 将同时期严重程度相当的中度以上烧伤住院患者72例随机分为治疗组(n=36)和对照组(n=36)。对照组按烧伤常规治疗;治疗组在常规治疗的基础上加用乌司他丁,特重烧伤每次300kU... 目的 探讨乌司他丁对严重烧伤患者脏器功能的作用。方法 将同时期严重程度相当的中度以上烧伤住院患者72例随机分为治疗组(n=36)和对照组(n=36)。对照组按烧伤常规治疗;治疗组在常规治疗的基础上加用乌司他丁,特重烧伤每次300kU,中重度烧伤每次200kU,每日2次,连续使用5~7d。两组创面均外用聚乙烯吡咯烷酮碘(聚维酮碘)软膏及解毒烧伤膏。检测两组患者治疗前后的血常规、肝功能(丙氨酸转氨酶)、肾功能(血尿素氮、血肌酐)、凝血指标(凝血酶原时间、国际标准化比值、活化部分凝血活酶时间、纤维蛋白原)、心肌酶(天冬氨酸转氨酶、乳酸脱氢酶、α-羟丁酸脱氢酶、肌酸激酶及其同工酶)、肌钙蛋白、肌红蛋白、动脉血气分析、创面细菌培养等。结果 应用乌司他丁患者均能平稳渡过休克期、感染期和围手术期,创面渗出、水肿减轻,28d病死率为0。治疗组和对照组中度烧伤患者各项检测指标比较差异均无显著性(P均〉0.05),重度以上烧伤患者各项检测指标两组比较差异均有显著性(P均〈0.05)。结论 乌司他丁能有效保护严重烧伤患者的脏器功能.适用于严重烧伤的急救治疗。 展开更多
关键词 乌司他丁 烧伤 器官功能 保护作用 严重烧伤 脏器功能 活化部分凝血活酶时间 聚乙烯吡咯烷酮碘 Α-羟丁酸脱氢酶 国际标准化比值
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提高人工复合皮修复能力的新策略 被引量:2
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作者 柯昌能 徐盈斌 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期 153-155,共3页
寻求理想的皮肤替代物,可为大面积烧伤患者提供足够的皮源以提高救治成功率;改善中、小面积烧(创)伤患者创面修复质量;提高患者的生存能力等,均具有重要的现实意义。随着细胞学、材料学、组织工程学的发展,各种生物敷料和皮肤替... 寻求理想的皮肤替代物,可为大面积烧伤患者提供足够的皮源以提高救治成功率;改善中、小面积烧(创)伤患者创面修复质量;提高患者的生存能力等,均具有重要的现实意义。随着细胞学、材料学、组织工程学的发展,各种生物敷料和皮肤替代物相继出现,为实现皮肤的修复与再生带来了巨大的希望。具有表皮和真皮结构的复合皮(composite skin,cs),是当前皮肤组织工程学的研究热点。目前虽然在CS的研究上取得了一些进展,并有成品上市,但其修复能力有限。本文就当前CS存在的一些不足和提高其修复能力的可能途径作一综述。 展开更多
关键词 修复能力 人工复合皮 大面积烧伤患者 皮肤组织工程学 皮肤替代物 救治成功率 修复质量 生物敷料 细胞学 材料学
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