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新靶点PPTase抗真菌药物的研究进展
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作者 孟玲宁 锦燕 +2 位作者 赵珺涛 徐竞竞 项明洁 《中国药物化学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期69-76,共8页
磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶(phosphopantetheinyl transferase,PPTase)可修饰脂肪酸合成酶、聚酮合成酶和非核糖体多肽合成酶复合体中的载体蛋白,使其由无活性形式转变成活性形式,同时它参与脂肪酸、聚酮、非核糖体多肽的合成,因而可作... 磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶(phosphopantetheinyl transferase,PPTase)可修饰脂肪酸合成酶、聚酮合成酶和非核糖体多肽合成酶复合体中的载体蛋白,使其由无活性形式转变成活性形式,同时它参与脂肪酸、聚酮、非核糖体多肽的合成,因而可作为抗菌药物有效的且颇具研究价值的新靶点。本文由PPTase的分类展开,进而阐述各类别发现的药物,综述该研究领域的最新进展,为新型抗真菌药物的研发提供参考。 展开更多
关键词 药物靶点 磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶(PPTase) 抗菌药
白念珠菌磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶蛋白Ppt2的制备 预览
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作者 孟玲宁 锦燕 +2 位作者 赵悦 王钰婷 项明洁 《中国真菌学杂志》 CSCD 2019年第1期11-15,共5页
目的制备白念珠菌磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶蛋白Ppt2,用于后期荧光偏振法筛选靶点为Ppt2酶的临床药物.方法以白念珠菌BWP17基因组DNA为模板,用PCR法扩增PPT2DNA序列,与线性化载体pET43.1a(+)通过同源重组连接,成功构建重组表达质粒pET43... 目的制备白念珠菌磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶蛋白Ppt2,用于后期荧光偏振法筛选靶点为Ppt2酶的临床药物.方法以白念珠菌BWP17基因组DNA为模板,用PCR法扩增PPT2DNA序列,与线性化载体pET43.1a(+)通过同源重组连接,成功构建重组表达质粒pET43.1a(+)/PPT2后转化入大肠埃希菌感受态细胞BL21(DE3),通过IPTG诱导重组蛋白表达,利用超声破碎法抽提蛋白Ppt2后离心收集上清和沉淀,通过SDS-PAGE验证蛋白的可溶性.利用镍柱对蛋白进行纯化,对洗脱馏分透析富集目的蛋白.最后通过Bradford方法测得蛋白含量.结果在大肠埃希菌BL21中获得了白念珠菌蛋白Ppt2的高效表达;抽提蛋白后SDS-PAGE电泳结果显示Ppt2同时存在可溶性形式和包涵体形式,放大摇菌量后收集上清可溶性蛋白经镍柱纯化得到目的蛋白,再次透析富集蛋白Ppt2后利用Bradford方法测得蛋白Ppt2浓度为0.4mg/mL.结论成功制备了白念珠菌的磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶蛋白Ppt2,为后期利用荧光偏振法筛选靶点为Ppt2酶的临床药物提供基础. 展开更多
关键词 白念珠菌 磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶Ppt2 蛋白制备纯化
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酵母相和菌丝相白念珠菌感染阴道上皮细胞免疫反应的比较 预览
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作者 王钰婷 王玉柱 +3 位作者 锦燕 孟玲宁 李卫华 项明洁 《中国真菌学杂志》 CSCD 2019年第4期193-199,共7页
目的白念珠菌作为一种二相菌,存在酵母相和菌丝相二态,本实验研究这两种不同形态的白念珠菌刺激阴道上皮细胞,比较其引起的免疫应答差异。方法以阴道上皮细胞株VK2/E6E7为模型,分别给予不同浓度的活的白念珠菌和热灭活白念珠菌SC5314(... 目的白念珠菌作为一种二相菌,存在酵母相和菌丝相二态,本实验研究这两种不同形态的白念珠菌刺激阴道上皮细胞,比较其引起的免疫应答差异。方法以阴道上皮细胞株VK2/E6E7为模型,分别给予不同浓度的活的白念珠菌和热灭活白念珠菌SC5314(感染指数MOI分别为10、50、100)进行刺激,以实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和酶联免疫吸附法(ELISA)检测3 h、6 h、12 h感染组细胞的促炎因子TNF-α和趋化因子IL-8的分泌水平。结果活的白念珠菌在K-SFM细胞培养基中呈菌丝相,热灭活的白念珠菌在K-SFM培养基中呈酵母相。两相感染组分泌IL-8和TNF-α水平与未感染组相比具有显著差异。在各个MOI条件下,菌丝相感染组释放细胞因子mRNA水平均显著高于酵母相;在MOI=10时,菌丝相感染组释放细胞因子的蛋白水平强于酵母相感染组,而随着MOI的增大,结果相反。结论酵母相和菌丝相白念珠菌均能诱发阴道上皮细胞出现显著免疫反应。同时,在MOI=10时,菌丝相白念引起的免疫反应强于酵母相白念。两相感染组免疫反应强度的差异提示两者引起免疫应答的机制可能不同。 展开更多
关键词 白念珠菌 外阴阴道念珠菌病 菌丝 阴道上皮 炎症
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血清淀粉样蛋白A在胃癌辅助诊断中的临床应用 预览
4
作者 锦燕 赵珺涛 +2 位作者 孟玲宁 王钰婷 项明洁 《标记免疫分析与临床》 CAS 2019年第9期1512-1517,共6页
目的研究血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A,SAA)检测在胃癌诊断中的价值。方法收集2018年11月至2019年4月医院收治并经病理确诊的治疗前胃癌患者156例、治疗后胃癌123例,并取慢性浅表性胃炎30例、萎缩性胃炎30例及健康人群105例作为对照... 目的研究血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A,SAA)检测在胃癌诊断中的价值。方法收集2018年11月至2019年4月医院收治并经病理确诊的治疗前胃癌患者156例、治疗后胃癌123例,并取慢性浅表性胃炎30例、萎缩性胃炎30例及健康人群105例作为对照,采用乳胶增强免疫比浊法检测血清SAA水平。结果利用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线计算出SAA的最佳临界值为3.67 mg/L,以此作为阳性诊断临界点,其约登指数最大时(33.1%)的灵敏度为39.1%,特异性为93.3%,联合癌胚抗原(carcineoembryonic antigen,CEA)、CA19-9、CA724检测灵敏度则升至44.2%。血清SAA在区别胃癌与慢性浅表性胃炎或慢性萎缩性胃炎时差异有统计学意义(P<0.05);在不同肿瘤位置、TNM分期、分化程度、远处转移情况、肿瘤大小、区域淋巴结转移程度中差异也有统计学意义(P<0.05),而在不同性别、年龄、是否为印戒细胞癌、肿瘤侵润程度中差异无统计学意义(P>0.05);在病情稳定组与病情进展组、病情好转组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论血清SAA检测在治疗前胃癌及早期胃癌诊断的灵敏度上优于CEA、CA19-9、CA724,且SAA与胃癌病理以及治疗后病情关系密切,可用于胃癌筛查诊断、分期评估及病情监测。 展开更多
关键词 血清淀粉样蛋白A 胃癌 诊断 联合检测
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磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶在真菌和细菌的研究进展 预览
5
作者 孟玲宁 锦燕 +3 位作者 赵悦 吕婕 林伊静 项明洁 《中国真菌学杂志》 CSCD 2018年第5期305-308,共4页
磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶(phosphopantetheinyl transferases,PPTase)可催化脂肪酸合酶(fatty acid synthases,FAS)、聚酮合成酶(polyketide synthases,PKS)以及非核糖体肽合成酶(non-ribosomal peptide syntethases,NRPS)的... 磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶(phosphopantetheinyl transferases,PPTase)可催化脂肪酸合酶(fatty acid synthases,FAS)、聚酮合成酶(polyketide synthases,PKS)以及非核糖体肽合成酶(non-ribosomal peptide syntethases,NRPS)的酰基载体蛋白(acyl carrier protein,ACP)及肽酰载体蛋白(peptidyl carrier protein,PCP)等的翻译后修饰反应,将辅酶A(coenzyme A,CoA)上的磷酸泛酰巯基乙胺基转移到ACP及PCP的保守丝氨酸残基上,从而激发ACP及PCP的活性,由此脂肪酸、聚酮、非核糖体肽得以合成。在大部分真菌及细菌中都存在着PPTase,且其在生物代谢中起到重要的作用。现对其研究进展进行阐述。 展开更多
关键词 磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶 真菌 细菌
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无绿藻PCR ITS1-ITS2基因分型法的建立及应用 预览
6
作者 赵悦 朱巍巍 +4 位作者 锦燕 孟玲宁 王珏婷 李文静 项明洁 《中国真菌学杂志》 CSCD 2018年第1期4-7,共4页
目的建立无绿藻(Prototheca)PCR ITS1-ITS2基因鉴定分型方法,并通过系统发育树以研究各型别无绿藻菌株间的亲缘关系。方法 抽提5株无绿藻临床分离菌株的DNA,通过特异性引物扩增ITS1及ITS2区后,根据该区域核苷酸片段的差异进行基因... 目的建立无绿藻(Prototheca)PCR ITS1-ITS2基因鉴定分型方法,并通过系统发育树以研究各型别无绿藻菌株间的亲缘关系。方法 抽提5株无绿藻临床分离菌株的DNA,通过特异性引物扩增ITS1及ITS2区后,根据该区域核苷酸片段的差异进行基因分型,借助MEGA6.0软件建立系统发育树,并通过SSU rDNA测序加以验证。结果 5株菌株中,1株鉴定为P.zopfii hydrocarbonea,2株鉴定为P.wickerhamii。虽然由于数据库中缺乏P.zopfii portoricensis菌株ITS序列导致1、2号菌株不能被鉴定,但ITS区系统发育树中这两株菌仍被归为P.zopfii中独立的一簇,与SSU rDNA系统发育树相近,证明此分型方法无误。结论PCR ITS1-ITS2基因分型法可作为一种有效基因分型方法用于鉴定和监测无绿藻感染。 展开更多
关键词 无绿藻 无绿藻病 基因型 鉴定 ITS区
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多位点序列分型技术在热带念珠菌中的应用研究 预览
7
作者 王影 项明洁 +2 位作者 锦燕 叶书来 周馨 《中国真菌学杂志》 CSCD 2018年第6期321-326,共6页
目的探讨上海瑞金医院临床分离的热带念珠菌MLST (Multilocus sequence types,MLST)型别。方法连续收集上海市瑞金医院临床分离的热带念珠菌菌株,用PCR技术扩增热带念珠菌的6对管家基因,并对扩增片段进行纯化测序后与热带念珠菌MLST数... 目的探讨上海瑞金医院临床分离的热带念珠菌MLST (Multilocus sequence types,MLST)型别。方法连续收集上海市瑞金医院临床分离的热带念珠菌菌株,用PCR技术扩增热带念珠菌的6对管家基因,并对扩增片段进行纯化测序后与热带念珠菌MLST数据库比对得到临床菌株的二倍体序列型别DSTs (Diploid sequence types,DSTs),再利用eBURST V3软件对结果进行分析,用MEGA 6.0软件建立系统发育树,最后对部分临床菌株进行药物敏感性实验,探讨菌株耐药与基因型别之间的关系。结果临床分离的92株热带念珠菌分属于47个DSTs,其中15个DSTs是已经报道的,32个DSTs在本次研究中首次得到;DST507和DST376是本次研究中的优势型别,且属于同一个克隆簇。药敏实验显示属于优势型别的27株临床菌株中21株为唑类药物耐药菌株。结论 MLST技术是一种高效的基因分型技术;DST507和DST376是上海瑞金医院热带念珠菌的优势型别;唑类药物耐药菌株表现为DST507和DST376的聚集分布。 展开更多
关键词 热带念珠菌 基因分型 MLST DSTs
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白念珠菌White-Gray-Opaque表型转换系统的研究进展 预览
8
作者 王钰婷 锦燕 +2 位作者 赵悦 孟玲宁 项明洁 《中国真菌学杂志》 CSCD 2018年第6期367-370,共4页
白念珠菌是人类常见的条件致病菌,而表型转换是其重要的生物学特性,各个表型在宿主适应、感染、毒力及不同生活阶段发挥着不同作用。White-Gray-Opaque表型转换是白念珠菌的一种新型转换系统,该文从White-Gray-Opaque表型特点、影响表... 白念珠菌是人类常见的条件致病菌,而表型转换是其重要的生物学特性,各个表型在宿主适应、感染、毒力及不同生活阶段发挥着不同作用。White-Gray-Opaque表型转换是白念珠菌的一种新型转换系统,该文从White-Gray-Opaque表型特点、影响表型转换的调控因素、表型与宿主的相互作用等方面综述近年来白念珠菌在该表型系统中的研究进展,希望通过理解其形态调节的机制以寻找感染治疗的新策略。 展开更多
关键词 白念珠菌 表型转换 调节因子 毒力
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白念珠菌酰基载体蛋白1的制备
9
作者 孟玲宁 锦燕 +1 位作者 王钰婷 项明洁 《诊断学理论与实践》 2018年第6期645-649,共5页
目的 :通过在大肠埃希菌BL21中表达白念珠菌酰基载体蛋白1(acyl carrier protein 1,Acp1),以制备高纯度的目的蛋白。方法:采用PCR扩增目的基因ACP1后,在序列的C端拼接上6xHis tag及终止子,拼接完成后连接构建到质粒中,成为原核表达载体p... 目的 :通过在大肠埃希菌BL21中表达白念珠菌酰基载体蛋白1(acyl carrier protein 1,Acp1),以制备高纯度的目的蛋白。方法:采用PCR扩增目的基因ACP1后,在序列的C端拼接上6xHis tag及终止子,拼接完成后连接构建到质粒中,成为原核表达载体pET30a-ACP1,转化入大肠埃希菌感受态细胞BL21中,通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside, IPTG)诱导表达。收集表达产物后通过镍离子螯合柱纯化,最终利用考马斯亮蓝Bradford法测得目的蛋白含量。结果:白念珠菌酰基载体蛋白Acp1在大肠埃希菌BL21中高效表达;抽提纯化蛋白后行蛋白电泳检测,结果显示,在还原条件下Acp1一直存在2条相对分子质量为17 000的条带。经还原和非还原电泳及蛋白印迹法检测,结果显示该蛋白在非还原状态下有聚集。利用Bradford方法测得蛋白Acp1浓度为2.68 mg/mL。结论:成功制备了白念珠菌酰基载体蛋白Acp1,为后期利用荧光偏振法筛选靶点为Ppt2酶的临床药物提供基础。 展开更多
关键词 白念珠菌 酰基载体蛋白Acp1 蛋白制备纯化
等通道侧向挤压变形过程模拟 被引量:1
10
作者 兆华 锦燕 +1 位作者 史庆南 于晓华 《热加工工艺》 CSCD 北大核心 2017年第21期98-100,105共4页
采用实物网格和有限元模拟了等通道侧向挤压变形过程,对流动网格变化情况、应力一应变曲线进行了分析研究。结果表明:等通道侧向挤压变形呈中心对称,变形过程非常复杂,分为变形均匀区、变形不均匀区和未变形区三个区。应力应变曲线... 采用实物网格和有限元模拟了等通道侧向挤压变形过程,对流动网格变化情况、应力一应变曲线进行了分析研究。结果表明:等通道侧向挤压变形呈中心对称,变形过程非常复杂,分为变形均匀区、变形不均匀区和未变形区三个区。应力应变曲线分为快速增加阶段、缓慢增加至最大值和缓慢降低三个阶段。实物模拟和有限元模拟结果一致。 展开更多
关键词 大塑性变形 等通道转角挤压 物理模拟 有限元分析
高钛型高炉渣选择性还原前后物相演变规律探讨 预览
11
作者 史志新 锦燕 《冶金分析》 CSCD 北大核心 2017年第6期14-19,共6页
还原气氛下高炉渣中含钛物相的变化规律是高炉渣高温碳化的关键。实验综合偏光显微镜、扫描电镜(SEM)、矿物自动解理系统(MLA)和X射线衍射仪(XRD)对比还原前后高炉渣物相形貌变化,微区成分变化及物相组成变化规律。结果表明,还原... 还原气氛下高炉渣中含钛物相的变化规律是高炉渣高温碳化的关键。实验综合偏光显微镜、扫描电镜(SEM)、矿物自动解理系统(MLA)和X射线衍射仪(XRD)对比还原前后高炉渣物相形貌变化,微区成分变化及物相组成变化规律。结果表明,还原前后高炉渣中串珠状的钙钛矿转变为弥散状的碳化钛,深绿色板状的富钛透辉石消失不见;微区成分变化显著的是钛元素也从还原前高炉渣中的钙钛矿、攀钛透辉石和富钛透辉石中逐渐转移到碳化钛相和残留的含钛透辉石相中,其含量占还原后全钛的73.69%以上;还原后物相组成明显的变化是钙钛矿和富钛深绿透辉石的减少,碳化钛含量明显增多。 展开更多
关键词 高钛型高炉渣 选择性还原 形貌 物相演变
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白念珠菌与生物膜相关的耐药机制 预览 被引量:3
12
作者 孟玲宁 锦燕 +2 位作者 李文静 赵悦 项明洁 《中国真菌学杂志》 CSCD 2017年第2期124-127,共4页
白念珠菌在医疗植入材料上形成生物膜,导致高死亡率感染。成熟的生物膜具有强耐药性,使得生物膜相关感染难以治愈。文章主要从白念珠菌生物膜外排泵基因、细胞外基质以及压力应答等3个方面探讨白念珠菌生物膜的耐药机制,综述该研究方向... 白念珠菌在医疗植入材料上形成生物膜,导致高死亡率感染。成熟的生物膜具有强耐药性,使得生物膜相关感染难以治愈。文章主要从白念珠菌生物膜外排泵基因、细胞外基质以及压力应答等3个方面探讨白念珠菌生物膜的耐药机制,综述该研究方向的最新进展,为白念珠菌的临床防治策略制定提供参考。 展开更多
关键词 白念珠菌 生物膜 耐药机制 细胞外基质
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无绿藻研究进展 预览
13
作者 赵悦 朱巍巍 +4 位作者 锦燕 李文静 王影 史册 项明洁 《检验医学》 CAS 2017年第10期97-101,共5页
无绿藻是一种广泛存在于自然界的条件致病菌,感染动物时主要引起乳腺炎,对人的感染则主要表现为皮肤感染、鹰嘴滑囊炎和系统性感染。目前临床上仍将镜检和生化反应作为鉴定该菌的主要方法,但由于耗时长,主观影响较大,加之国内尚对无绿... 无绿藻是一种广泛存在于自然界的条件致病菌,感染动物时主要引起乳腺炎,对人的感染则主要表现为皮肤感染、鹰嘴滑囊炎和系统性感染。目前临床上仍将镜检和生化反应作为鉴定该菌的主要方法,但由于耗时长,主观影响较大,加之国内尚对无绿藻的认识不足,导致该菌的检出率较低。为提高对无绿藻的认识,文章对其生物学特性、致病性、流行病学特征、鉴定、耐药性及无绿藻病的临床表现等作一综述。 展开更多
关键词 无绿藻 无绿藻病 内孢子 条件致病菌 鉴定 基因型
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体外氟康唑诱导光滑念珠菌和近平滑念珠菌耐药及相关机制研究
14
作者 锦燕 王影 +5 位作者 李文静 赵悦 孟玲宁 朱巍巍 史册 项明洁 《诊断学理论与实践》 2017年第5期510-515,共6页
目的:研究光滑念珠菌和近平滑念珠菌对氟康唑耐药的易感性及其诱导耐药株的耐药机制。方法:选取对氟康唑敏感的光滑念珠菌、近平滑念珠菌临床株各1株以及对氟康唑敏感的光滑念珠菌标准株ATCC2001、近平滑念珠菌标准株ATCC22019.利用... 目的:研究光滑念珠菌和近平滑念珠菌对氟康唑耐药的易感性及其诱导耐药株的耐药机制。方法:选取对氟康唑敏感的光滑念珠菌、近平滑念珠菌临床株各1株以及对氟康唑敏感的光滑念珠菌标准株ATCC2001、近平滑念珠菌标准株ATCC22019.利用浓度递增法。在体外用氟康唑诱导使其成为耐药株。采用实时定量PCR检测外排泵相关基因、其转录因子和靶酶编码基因表达,并对光滑念珠菌PDRl转录因子、近平滑念珠菌MRRl转录因子和ERGll基因进行PCR扩增和测序。结果:光滑念珠菌较近平滑念珠菌更易被氟康唑诱导为耐药株,CDRl的过度表达为其主要的耐药机制,对PDRI转录因子测序后发现了新的突变位点Y932C、V847F。近平滑念珠菌诱导耐药株的MDRl表达显著增加,其MRRl转录因子中亦存在新的突变位点P295S、1799S。结论:光滑念珠菌和近平滑念珠菌对氟康唑的耐药易感性不同.耐药机制也存在差异。新发现的转录因子突变位点有待验证其功能。 展开更多
关键词 念珠菌 氟康唑耐药 外排泵 靶酶 转录因子
内毒素的检测方法与临床应用进展 被引量:1
15
作者 朱巍巍 万颖蕾 +3 位作者 锦燕 张华 陈华 项明洁 《诊断学理论与实践》 2017年第6期668-671,共4页
内毒素是革兰阴性菌细胞壁上的特有结构,其主要化学成分为脂多糖。细菌死亡后,内毒素从细胞结构中被释放出来,进入血液,可对机体产生许多致病作用,如作用于单核细胞和粒细胞等,释放内源性致热原从而引起发热;激活补体、凝血系统及降低血... 内毒素是革兰阴性菌细胞壁上的特有结构,其主要化学成分为脂多糖。细菌死亡后,内毒素从细胞结构中被释放出来,进入血液,可对机体产生许多致病作用,如作用于单核细胞和粒细胞等,释放内源性致热原从而引起发热;激活补体、凝血系统及降低血压,严重时会导致弥漫性血管内凝血。内毒素的检测方法内毒素从被发现至今已有百余年历史。 展开更多
关键词 细菌内毒素 检测方法 临床应用
抗真菌药物新作用靶点机制的研究进展 被引量:2
16
作者 孟玲宁 锦燕 +2 位作者 李文静 赵悦 项明洁 《诊断学理论与实践》 2017年第5期540-543,共4页
条件致病性真菌在过去的几十年中逐渐被认为是人类真菌感染的重要致病菌,尤其对于免疫功能低下的患者,如移植受者、艾滋病患者和癌症患者.由念珠菌属引起的侵袭性感染是现代血流感染的第四大死因。
关键词 真菌 新靶点 致病酶类 信号通路
海绵钛还原罐焊缝开裂原因及防止措施 预览
17
作者 王若愚 李大东 +1 位作者 陆鑫 锦燕 《电焊机》 2017年第1期74-79,共6页
海绵钛还原罐工况恶劣,焊缝受力大,使用一段时间部分罐体焊缝开裂。通过取样分析,还原罐材质为18-8型奥氏体不锈钢,裂纹产生于罐体外侧,焊缝开裂与还原罐工作温度高、焊缝受力太大、制造过程中焊接热输入太大导致的焊缝晶粒粗大密切相... 海绵钛还原罐工况恶劣,焊缝受力大,使用一段时间部分罐体焊缝开裂。通过取样分析,还原罐材质为18-8型奥氏体不锈钢,裂纹产生于罐体外侧,焊缝开裂与还原罐工作温度高、焊缝受力太大、制造过程中焊接热输入太大导致的焊缝晶粒粗大密切相关。还原罐喷淋冷却过程中,在水蒸汽与氯离子(Cl-)的共同作用下,加速了罐体的腐蚀和裂纹扩展。采取在还原罐下加支撑,减小焊缝受力,采用小线能量焊接,控制层间温度等措施,能降低还原罐焊缝开裂倾向,延长还原罐的使用寿命,降低海绵钛生产成本。 展开更多
关键词 不锈钢 裂纹 晶粒粗大 线能量 层间温度
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白念珠菌FLO8基因高表达菌株构建及鉴定
18
作者 李文静 锦燕 +3 位作者 史册 王影 赵悦 项明洁 《诊断学理论与实践》 2016年第1期9-14,共6页
目的 :构建白念珠菌FLO8基因高表达菌株。方法 :将白念珠菌FLO8基因插入p CP20质粒载体ADH1启动子后,通过聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)将ADH1-FLO8-Lox P-ARG4-Lox P-ADE2片段扩增,并通过同源重组技术将该片段整合... 目的 :构建白念珠菌FLO8基因高表达菌株。方法 :将白念珠菌FLO8基因插入p CP20质粒载体ADH1启动子后,通过聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)将ADH1-FLO8-Lox P-ARG4-Lox P-ADE2片段扩增,并通过同源重组技术将该片段整合至SN152的ADE2位点。结果:通过测序鉴定FLO8基因高表达质粒载体构建成功;通过同源重组及实时反转录PCR验证表明FLO8基因整合到SN152菌株的ADE2位点并且表达量增高。结论:以p CP20质粒为载体,通过同源重组等技术,可高效构建白念珠菌FLO8基因高表达菌株。 展开更多
关键词 白念珠菌 FLO8基因 高表达
焊管压扁开裂的原因分析
19
作者 张达富 吴安术 锦燕 《物理测试》 CAS 2016年第5期41-45,共5页
某厂家的焊管在压扁试验过程中开裂,为找出焊管开裂的原因,在实验室对末开裂焊管进行了压扁验证试验,观察了开裂管的宏观形貌.并采用微观断口观察、金相分析及金属流线上升角测定等测试分析手段进行综合分析.结果表明,焊管开裂的主要原... 某厂家的焊管在压扁试验过程中开裂,为找出焊管开裂的原因,在实验室对末开裂焊管进行了压扁验证试验,观察了开裂管的宏观形貌.并采用微观断口观察、金相分析及金属流线上升角测定等测试分析手段进行综合分析.结果表明,焊管开裂的主要原因是由于焊管中存在的硫化物夹杂破坏了焊管金属的连续性,在焊接过程中,焊缝处于较大挤压力下,使得金属流线上升角过大且露头,从而引起开裂,裂纹沿着管材的中心偏析位置向内扩展. 展开更多
关键词 压扁试验 SEM 中心偏析 金属流线上升角
蛋白质组学在白假丝酵母研究中的应用 预览 被引量:1
20
作者 锦燕 史册 +4 位作者 王影 李文静 赵悦 朱巍巍 项明洁 《上海交通大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1804-1808,共5页
白假丝酵母(C.albicans)是人类最常见的条件性致病真菌,其引起的侵袭性C.albicans病是导致日益增多的免疫功能低下患者发病和死亡的原因之一。目前,临床抗真菌药物种类有限,耐药现象增多,新药物研发进展缓慢,导致临床治疗压力极大... 白假丝酵母(C.albicans)是人类最常见的条件性致病真菌,其引起的侵袭性C.albicans病是导致日益增多的免疫功能低下患者发病和死亡的原因之一。目前,临床抗真菌药物种类有限,耐药现象增多,新药物研发进展缓慢,导致临床治疗压力极大。近期发展起来的蛋白质组学研究提供了有效的新技术平台,已应用于C.albicans的致病因子、耐药机制、免疫应答和抗真菌药物作用机制研究等方面。该文对近年来蛋白质组学技术新发展及应用于C.albicans相关研究进展作一综述。 展开更多
关键词 蛋白质组学 生物质谱 白假丝酵母
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