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辐射诱导小鼠外周血网织红细胞微核与骨髓嗜多染红细胞微核的剂量-效应关系 被引量:2
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作者 丽波 张俭 +2 位作者 宇光 倪冠英 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期122-125,共4页
目的观察x射线照射后小鼠外周血网织红细胞微核(MN-RET)和骨髓嗜多染红细胞微核(MN-PCE)的变化,为探索快速、高通量的辐射生物剂量计奠定基础。方法54只ICR雄性小鼠随机分为3组,每组18只,分别施予x射线全身照射,吸收剂量分别为0... 目的观察x射线照射后小鼠外周血网织红细胞微核(MN-RET)和骨髓嗜多染红细胞微核(MN-PCE)的变化,为探索快速、高通量的辐射生物剂量计奠定基础。方法54只ICR雄性小鼠随机分为3组,每组18只,分别施予x射线全身照射,吸收剂量分别为0、0.5、1、2、4和5Gy。在照射后24、48和72h,分别采用流式细胞术(FCM)和人工镜检的方法,观察外周血MN-RET和骨髓MN-PCE的变化。结果在0.5-5.0Gy范围内,3个时间点外周血MN-RET和骨髓MN-PCE均随剂量的增加而升高,剂量-效应曲线可拟合成直线回归方程(t=10.26-25.77,P〈0.05);外周血MN-RET和骨髓MN·PCE之间明显相关(r=0.986-0.996,P〈0.05)。结论FCM检测MN-RET有望成为快速、高通量的辐射生物剂量计或辅助诊断方法。 展开更多
关键词 辐射 小鼠 外周血网织红细胞微核 骨髓嗜多染红细胞微核 流式细胞术 生物剂量计
辐射诱导细胞周期调控和DNA损伤反应相关基因表达变化的实验研究 预览 被引量:2
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作者 金顺子 武宁 +4 位作者 丽波 张萱 倪冠英 宇光 《辐射防护》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期70-79,共10页
采用实时定量PCR技术检测小鼠胸腺和脾脏基因表达对X射线全身照射的反应,为探索可行的辐射生物标志物打下实验基础。研究中选用细胞周期调控和DNA损伤反应相关基因Cdkn1a、Ccnd1、Ccnb1、Gadd45a、Atm和Fdxr,以Gapdh为参考基因,观察0.5... 采用实时定量PCR技术检测小鼠胸腺和脾脏基因表达对X射线全身照射的反应,为探索可行的辐射生物标志物打下实验基础。研究中选用细胞周期调控和DNA损伤反应相关基因Cdkn1a、Ccnd1、Ccnb1、Gadd45a、Atm和Fdxr,以Gapdh为参考基因,观察0.5、1、2、4、6 Gy X射线全身照射后4和24小时上述基因在胸腺和脾脏的相对表达量的变化。同时计数骨髓细胞涂片嗜多染红细胞(PCE)的微核率进行对比。结果显示,上述6种基因对电离辐射全身作用都出现变化,但以Cdkn1a、Ccnd1和Ccnb1三者对全身照射的剂量效应关系较为明显,其中Cdkn1a和Ccnd1基因的表达随辐射剂量增加而升高,Ccnb1基因的表达随辐射剂量增加而下降。剂量效应曲线可拟合为线性-平方方程,其相关系数r为0.851~0.998,p〈0.05~0.01。但与嗜多染红细胞微核率进行对比,Ccnd1和Ccnb1的表达只有部分结果与之具有显著的相关关系。Cdkn1a的表达量则不仅随辐射剂量增加而升高,而且与嗜多染红细胞微核率的剂量-效应曲线明显相关,在两器官和两时间点其相关系数为0.950~0.975,p〈0.01。另一方面Cd-kn1a表达量变化的幅度较大,照射后4小时和24小时胸腺的最高表达量分别为11.2和11.3倍,脾脏的最高表达量分别为20.6和9.3倍。鉴于实时定量PCR技术适用于快速、高通量检测,通过进一步在人体观察验证,Cdkn1a基因表达变化有可能成为研制新的辐射生物剂量计的候选者。 展开更多
关键词 Cdkn1a CCND1 Ccnb1 GADD45A Atm Fdxr 实时定量PCR 基因表达变化 骨髓嗜多染红细胞微核率 辐射生物剂量计
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X射线全身照射诱导小鼠胸腺Egr-1和Egr-4基因表达水平的实时定量RT—PCR分析 被引量:2
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作者 武宁 丽波 +4 位作者 张萱 金顺子 倪冠英 宇光 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期147-151,共5页
目的应用实时定量RT—PCR技术检测X射线全身照射诱导小鼠胸腺Egr-1和Egr-4基因的表达变化。方法小鼠接受X射线全身照射后4和24h,提取胸腺mRNA,以GAPDH作为内参基因,利用实时定量RT—PCR检测方法,探讨Egr-1和Egr-4基因的相对表达量... 目的应用实时定量RT—PCR技术检测X射线全身照射诱导小鼠胸腺Egr-1和Egr-4基因的表达变化。方法小鼠接受X射线全身照射后4和24h,提取胸腺mRNA,以GAPDH作为内参基因,利用实时定量RT—PCR检测方法,探讨Egr-1和Egr-4基因的相对表达量与不同照射剂量之间的关系。同时计数骨髓嗜多染红细胞微核率作为辐射生物剂量参照。结果Egr-1和Egr-4基因表达量在0.5~6Gy全身照射后4和24h均与照射剂量之间存在显著的相关性(r=0.974,0.987,0.978,0.999,P〈0.01),其剂量效应曲线可拟合成线性平方方程。各剂量点Egr-1和Egr-4基因表达量与骨髓嗜多染红细胞微核率高度相关(r=0.866、0.947、0.983、0.835,P〈0.05)。进一步分析表明,照射后4hEgr-4基因表达不仅剂量效应关系良好,且增幅最为明显,并与骨髓嗜多染红细胞微核率的剂量效应曲线相平行。结论实时定量RT—PCR技术检测Egr-4基因的早期表达有可能成为建立大批量、快速辐射生物剂量估算方法的候选者。 展开更多
关键词 实时定量RT—PCR EGR-1 Egr-4 骨髓嗜多染红细胞微核 辐射生物剂量计
低水平辐射致癌效应的阈值问题 预览 被引量:5
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作者 《辐射防护》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期349-361,共13页
本文综述了近年有关电离辐射致癌剂量效应关系的流行病学调查和放射生物学研究资料,重点讨论辐射致癌是否存在阈值的问题。介绍了国际学术团体对这一问题的不同论述以及美国能源部低剂量辐射研究10年计划(1999—2008年)迄今取得的进展。
关键词 低水平辐射 辐射致癌 线性无阈假说 剂量阈值
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低剂量电离辐射在C57BL/6J小鼠肿瘤基因-放疗方案中的作用 预览 被引量:1
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作者 武宁 张海玉 +1 位作者 金顺子 《辐射防护》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期193-196,249共5页
为探讨低剂量电离辐射在C57BL/6J小鼠肿瘤基因-放疗方案中的作用,对荷瘤小鼠采用不同的治疗方案(单纯多次大剂量局部照射、单次大剂量局部照射加多次低剂量全身照射、pEgr-IL18-B7.1基因联合放疗),观察其对肿瘤重量、全肺表面转... 为探讨低剂量电离辐射在C57BL/6J小鼠肿瘤基因-放疗方案中的作用,对荷瘤小鼠采用不同的治疗方案(单纯多次大剂量局部照射、单次大剂量局部照射加多次低剂量全身照射、pEgr-IL18-B7.1基因联合放疗),观察其对肿瘤重量、全肺表面转移结节数以及肿瘤间质微血管密度的影响。结果显示,采用单纯放疗和基因-放疗与对照组相比均能显著降低肿瘤重量、全肺表面转移结节数和肿瘤间质微血管密度;单纯放疗方案中应用单次大剂量局部照射加多次低剂量全身照射与单纯多次大剂量局部照射相比,在降低治疗剂量的同时,能达到相近似的抑瘤效果。在基因-放疗方案中,基因导入联合单次大剂量局部照射后加多次低剂量全身照射的治疗效果明显优于联合应用常规多次大剂量局部照射。提示低剂量电离辐射可以通过减轻肿瘤负荷、减少肿瘤远处转移和抑制肿瘤间质血管形成,增强基因-放疗方案的抑瘤作用。 展开更多
关键词 低剂量电离辐射 C57BL/6J小鼠 pEgr-IL18-B7.1重组质粒 基因-放疗
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低剂量辐射增强小鼠肿瘤基因-放射治疗效应的免疫学机制研究
6
作者 武宁 单玉兴 +1 位作者 金顺子 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期441-444,共4页
目的探讨低剂量辐射全身照射对小鼠Lewis肺癌移植肿瘤基因-放疗方案中的免疫增强作用机制。方法小鼠右后肢皮下接种Lewis肺癌细胞建立荷瘤模型,基因.放疗组中小鼠肿瘤局部注射由多聚乙烯亚胺包裹的pEgr-IL18-B7.1重组质粒,分别接受... 目的探讨低剂量辐射全身照射对小鼠Lewis肺癌移植肿瘤基因-放疗方案中的免疫增强作用机制。方法小鼠右后肢皮下接种Lewis肺癌细胞建立荷瘤模型,基因.放疗组中小鼠肿瘤局部注射由多聚乙烯亚胺包裹的pEgr-IL18-B7.1重组质粒,分别接受由2Gy局部照射和0.075Gy全身照射组合的不同治疗方案,通过^3H—TdR标记方法检测小鼠CTL和NK细胞毒活性,ELISA方法检测TNF-α和IFN-γ分泌活性,观察各治疗组对荷瘤小鼠抗肿瘤免疫的作用。结果在pEgr-IL18-B7.1基因治疗方案中,单次大剂量辐射局部照射后加多次低剂量全身照射与常规多次大剂量辐射局部照射相比,小鼠CTL和NK细胞毒活性显著增强,TNF-α和IFN-γ分泌活性有不同程度的增高。结论低剂量辐射可以通过促进CTL和NK细胞毒效应,上调TNF-α和IFN-γ细胞因子表达,从而增强机体抗肿瘤免疫功能,提高肿瘤基因-放疗的抑瘤效果。 展开更多
关键词 低剂量辐射 肿瘤基因-放疗 LEWIS肺癌细胞
KPNB3基因多态性与精神分裂症的关系 预览
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作者 胡颖 丽波 +5 位作者 鞠桂芝 张萱 谢林 史杰萍 于雅琴 《吉林大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期 526-528,532,共4页
目的:证实中国人群KPNB3基因与精神分裂症的关系。方法:采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,检测中国汉族精神分裂症患者和其健康父母双亲的组成的304个核心家系成员位于KPNB3基因上的2个单核苷酸多态性(SNPs... 目的:证实中国人群KPNB3基因与精神分裂症的关系。方法:采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,检测中国汉族精神分裂症患者和其健康父母双亲的组成的304个核心家系成员位于KPNB3基因上的2个单核苷酸多态性(SNPs)rs2588014和rs626716。利用拟合优度2χ检验分析基因型分布频率是否符合Hardy-Weinberg平衡定律,应用UNPHASED软件包进行2个SNPs的传递不平衡检验(TDT)、单倍型分析和连锁不平衡程度的测量。结果:rs626716和rs2588014等位基因和基因型频率分布,患者组和其父母组比较差异均无显著性,符合Hardy-Weinberg平衡定律(P〉0.05)。传递不平衡检验(TDT)结果显示,rs626716位点杂合子父母传递给患病子女的等位基因存在传递不平衡性(χ^2=9.31,P=0.002 3);rs2588014位点杂合子父母的2个不同等位基因传递给患病子女的致病等位基因概率未偏离50%(χ^2=3.44,P=0.064)。单倍型分析显示,在患病子女中rs2588104(C)-rs626716(C)单倍型传递与未传递的频率分布比较差异有显著性(χ^2=9.8,P=0.006 8)。结论:在中国北方汉族人群中,KPNB3基因多态性可能与精神分裂症的发生有关。 展开更多
关键词 染色体 13对 KPNB3 多态性 单核苷酸 精神分裂症/遗传学
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低剂量X射线在优化pEgr-IL18-B7.1基因-放疗方案中的作用 被引量:2
8
作者 武宁 陈光伟 +2 位作者 永哲 金顺子 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期 223-225,共3页
目的观察低剂量X射线全身照射在接种Lewis肺癌小鼠的pEgr-IL18-B7.1基因-放疗中的抑瘤作用。方法基因-放疗组中小鼠肿瘤局部注射由多聚乙烯亚胺包裹的pEgr-IL18-B7.1重组质粒,分别接受由2GyX射线局部照射和0.075GyX射线全身照射组合的... 目的观察低剂量X射线全身照射在接种Lewis肺癌小鼠的pEgr-IL18-B7.1基因-放疗中的抑瘤作用。方法基因-放疗组中小鼠肿瘤局部注射由多聚乙烯亚胺包裹的pEgr-IL18-B7.1重组质粒,分别接受由2GyX射线局部照射和0.075GyX射线全身照射组合的不同治疗方案,观察各种治疗方案在荷瘤小鼠中的抑瘤作用。结果与单纯多次大剂量X射线局部照射相比,单次大剂量X射线局部照射后加多次低剂量全身照射在联合pEgr-IL18-B7.1基因治疗中能体现出更为有效的抑制肿瘤生长作用。结论低剂量X射线全身照射作为一种优化手段,可有效增强pEgr-IL18-B7.1基因-放疗的抑瘤效果。 展开更多
关键词 低剂量X射线 pEgr-IL18-B7.1重组质粒 基因-放疗 LEWIS肺癌细胞
X射线全身照射诱导小鼠脾细胞LAMP-1表达的时程变化 被引量:1
9
作者 徐瑞明 陈光伟 +4 位作者 武宁 永哲 金顺子 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期 121-124,共4页
目的观察X射线全身照射对小鼠脾细胞LAMP-1表达的影响。方法采用流式细胞术检测0.075和2Gy X照射后不同时间(0、2、4、8、16、24和48h)以及用Con A刺激4h后,脾细胞表面表达LAMP-1的阳性细胞数。结果脾细胞表面的LAMP-1在2Gy X射线... 目的观察X射线全身照射对小鼠脾细胞LAMP-1表达的影响。方法采用流式细胞术检测0.075和2Gy X照射后不同时间(0、2、4、8、16、24和48h)以及用Con A刺激4h后,脾细胞表面表达LAMP-1的阳性细胞数。结果脾细胞表面的LAMP-1在2Gy X射线全身照射后8、16和24h表达明显下降;0.075Gy X射线全身照射后2h显著升高,而48h又下降到低于对照的水平。0.075和2Gy X射线全身照射后再加用Con A(10μg/μl)刺激4h,LAMP-1的表达均增强;但是此时2Gy的效应比0.075Gy更明显。结论LAMP-1参与电离辐射作用下免疫信号的传导,高剂量X射线抑制它的表达,而低剂量X射线在早期对其表达有促进作用,与体内免疫细胞的活性密切相关。Con A促进免疫细胞表面LAMP-1的表达。 展开更多
关键词 X射线 T细胞 NK细胞 LAMP-1 流式细胞术
p53基因突变子175H、248W和273H的定点突变及表达载体的构建 预览 被引量:1
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作者 赵银龙 +3 位作者 晓冬 马淑梅 龚守良 《吉林大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期 543-546,共4页
目的:定点诱变合成p53基因突变子进而构建表达载体。方法:以野生型p53基因为模板,采用PCR体外定点突变技术,设计2对引物,将突变位点设计在引物上,通过重叠延伸法2次PCR扩增,扩增片段上含有所需要的突变位点,最后将扩增片段克隆... 目的:定点诱变合成p53基因突变子进而构建表达载体。方法:以野生型p53基因为模板,采用PCR体外定点突变技术,设计2对引物,将突变位点设计在引物上,通过重叠延伸法2次PCR扩增,扩增片段上含有所需要的突变位点,最后将扩增片段克隆入pcDNA3.1载体中。结果:在预期位点已经发生突变,p53基因第175位密码子由精氨酸(cgc)突变为组氨酸(cac),第248位密码子由精氨酸(cgg)突变为色氨酸(tgg),第273位密码子由精氨酸(cgt)突变为组氨酸(cat)。p53基因突变子表达载体成功构建。结论:PCR技术诱导定点突变准确、高效。基因突变体的成功构建,为进一步研究该突变位点奠定了基础。 展开更多
关键词 基因 p53 突变子 定点突变 遗传载体 聚合酶链反应/方法
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逆转录病毒载体介导shRNA对人胚胎肾细胞中p53基因的沉默作用 预览 被引量:3
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作者 马淑梅 +6 位作者 晓冬 金顺子 徐瑞明 武宁 赵银龙 龚守良 《吉林大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期 228-231,共4页
目的:检测逆转录病毒载体介导的小发夹环RNA(small hairpin RNA,shRNA)对人胚胎肾细胞(HEK293)中p53基因的干扰作用。方法:将人H3启动子由XholⅠ和EcoRⅠ酶切位点插入CMV启动子上游,人CD4基因替代匀霉素抗性基因,作为检测标志... 目的:检测逆转录病毒载体介导的小发夹环RNA(small hairpin RNA,shRNA)对人胚胎肾细胞(HEK293)中p53基因的干扰作用。方法:将人H3启动子由XholⅠ和EcoRⅠ酶切位点插入CMV启动子上游,人CD4基因替代匀霉素抗性基因,作为检测标志。针对人野生型p53基因设计的shRNA被连接在H3启动子的下游,构建含有shRNA的逆转录病毒载体LTRH1-p53,即RNAi表达载体;利用流式细胞术检测逆转录病毒感染HEK293细胞72h后细胞内P53蛋白水平的变化。结果:成功构建LTRH1-p53载体,该载体感染HEK293细胞后72h,与感染空病毒载体LTRH。组相比,P53蛋白表达降至空病毒载体LTRH1组的690/4(P〈0.01)。结论:LTRH1-p53表达载体成功使p53基因沉默,shRNA表达载体的使用为基因功能研究提供有力工具。 展开更多
关键词 RNA干扰 基因 p53 逆转录病毒载体 SHRNA
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IL-12联合B7—1基因放射治疗对小鼠B16移植肿瘤生长的影响 预览 被引量:2
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作者 杨英 付士波 《吉林大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期 947-949,共3页
目的:探讨基因联合放疗对小鼠B16移植肿瘤的抑制作用。方法:碱裂解法提取纯化质粒DNA,微量注射法直接将质粒DNA导入体内肿瘤;建立荷瘤小鼠模型,于小鼠右后肢皮下接种5×10^5个B16黑色素瘤细胞,待肿瘤直径达0.3~0.5cm时开... 目的:探讨基因联合放疗对小鼠B16移植肿瘤的抑制作用。方法:碱裂解法提取纯化质粒DNA,微量注射法直接将质粒DNA导入体内肿瘤;建立荷瘤小鼠模型,于小鼠右后肢皮下接种5×10^5个B16黑色素瘤细胞,待肿瘤直径达0.3~0.5cm时开始治疗;肿瘤局部注射pNE-mIL-12和pcDNA—B7—1质粒3次,并给予3次X线照射,观察小鼠移植肿瘤的生长情况。结果:pNE-mIL-12重组质粒与pcDNA—B7—1质粒联合2Gy放射治疗组肿瘤生长速率最低,小鼠生存时间明显延长(P〈0.01~P〈0.001),末次照射后31d小鼠死亡率仅为22.2%,而且其中有1只小鼠肿瘤消退。结论:多基因联合放疗可有效抑制小鼠B16移植肿瘤的生长,其效果好于单基因治疗和单纯放疗。 展开更多
关键词 白细胞介素12 抗原 CD80 辐射 电离 基因疗法 肿瘤 实验性
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肿瘤相关抗原肽与低剂量全身照射的协同抑瘤作用 被引量:1
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作者 孙祖玥 付静宜 +5 位作者 建香 付士波 李修义 赵勇 龚守良 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期 248-251,共4页
目的观察低剂量X射线照射对小鼠肝癌H-22细胞膜相关抗原肽(TAP)提取物的抑瘤作用及免疫学功能的影响,为低剂量辐射(LDR)与肿瘤疫苗联合治疗肿瘤提供实验依据.方法采用微酸洗脱法制备相对分子质量≤3×106的细胞膜TAP提取物,先给予小... 目的观察低剂量X射线照射对小鼠肝癌H-22细胞膜相关抗原肽(TAP)提取物的抑瘤作用及免疫学功能的影响,为低剂量辐射(LDR)与肿瘤疫苗联合治疗肿瘤提供实验依据.方法采用微酸洗脱法制备相对分子质量≤3×106的细胞膜TAP提取物,先给予小鼠75 mGy X射线全身照射,12 h后以TAP提取物皮下免疫小鼠,检测脾细胞CD3、CD69和TCRαβ表面标记、脾T细胞亚组百分数的变化、脾细胞Con A反应性、IL-2和IFN-γ活性、CTL杀伤活性的变化及抑瘤效应.结果小鼠经TAP提取物免疫后,移植肿瘤的发生率降低,肿瘤平均出现时间延迟,生长速度减慢;脾细胞CD3分子和CD69分子的表达显著升高,脾细胞Con A反应性、IFN-γ分泌活性和CTL杀伤活性显著增强,IL-2分泌增多.而同时给予LDR的小鼠不仅上述功能不同程度增强,脾CD8+细胞百分数显著增高.结论LDR与细胞膜TAP具有协同抑瘤作用,细胞免疫力的明显增强可能为其机制之一. 展开更多
关键词 协同抑瘤作用 抗原肽 肿瘤相关 低剂量辐射(LDR) CTL杀伤活性 低剂量X射线照射 X射线全身照射 CD8^+细胞 IFN-γ 相对分子质量 CD69 IL-2 免疫学功能 75mGy T细胞亚组 CD3分子 细胞免疫力 提取物 TAP 脾细胞 细胞膜 H-22
膜转运蛋白基因单核苷酸多态性与精神分裂症 预览
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作者 谢林 鞠桂芝 +4 位作者 史杰萍 于雅琴 桑红 尉军 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期 1166-1167,共2页
目的探讨腭心面综合征中缺失的膜转运蛋白基因(claudin 5transmembrane protein deleted in velocardio-facial syndrome,CLDN5)单核苷酸多态性与精神分裂症的关系.方法在173个汉族精神分裂症核心家系中,以PCR和限制性片段长度多态(RFLP... 目的探讨腭心面综合征中缺失的膜转运蛋白基因(claudin 5transmembrane protein deleted in velocardio-facial syndrome,CLDN5)单核苷酸多态性与精神分裂症的关系.方法在173个汉族精神分裂症核心家系中,以PCR和限制性片段长度多态(RFLP)方法对CLDN5基因rs739371(G/C碱基改变)单核苷酸多态性(SNP)进行检测.应用基于家系的连锁不平衡方法分析基因型数据.结果(1)CLDN5基因的rs739371等位基因和基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05).(2)TDT结果提示CLDN5基因rs739371与精神分裂症无连锁及关联.(3)CLDN5基因的rs739371位点基因型与精神分裂症的阳性症状影响妄想相关联(x2=8.639,v=2,P=0.013).结论对于本研究的中国汉族精神分裂症患者来说,CLDN5基因本身或其附近的基因可能与精神分裂症的易感性相关. 展开更多
关键词 精神分裂症 染色体22Q11 单核苷酸多态性 膜转运蛋白基因(CLDN5)
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褪黑素对小鼠淋巴细胞电离辐射损伤的防护作用 预览 被引量:2
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作者 张萱 王珍琦 +4 位作者 吕哲 龚守良 张铭 《中国辐射卫生》 北大核心 2005年第2期 96-99,共4页
目的探讨褪黑素(MLT)对小鼠淋巴细胞电离辐射损伤的防护作用及其机制.方法采用流式细胞术和荧光分光光度法在离体和整体条件下分别检测小鼠淋巴细胞凋亡小体百分率和DNA裂解率.在此基础上,腹腔注射MLT,观察2GyX射线全身照射后24h小鼠胸... 目的探讨褪黑素(MLT)对小鼠淋巴细胞电离辐射损伤的防护作用及其机制.方法采用流式细胞术和荧光分光光度法在离体和整体条件下分别检测小鼠淋巴细胞凋亡小体百分率和DNA裂解率.在此基础上,腹腔注射MLT,观察2GyX射线全身照射后24h小鼠胸腺、脾脏淋巴细胞数量及胸腺细胞3H-TdR掺入率和Con A、LPS诱导的脾T、B淋巴细胞转化率的变化.结果离体研究中,小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞体外接受0.5~6.0Gy照射后,凋亡小体百分率、DNA裂解率均呈剂量依赖性增加,而照射前预先加入2mmol/LMLT,细胞凋亡小体百分率、DNA裂解率与单纯照射组比较均显著降低.整体研究中,2Gy全身照射前腹腔注射MLT,小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞凋亡小体百分率和DNA裂解率显著低于单纯照射组,接近或低于假照水平,MLT剂量在0.1~2.5mg/kg范围内均有作用,但无明显剂量依赖性.小鼠胸腺、脾脏淋巴细胞数量、胸腺细胞3H-TdR掺入率及有丝分裂原诱导的脾脏T、B淋巴细胞转化率在2Gy全身照射后均显著低于假照组(P<0.001).0.5~10mg/kg MLT预先腹腔注射,胸腺、脾脏淋巴细胞数显著高于0mg/kg体重组(单纯照射),其中0.5 mg/kg体重组增高最显著;胸腺细胞3H-TdR掺入率显著增高(P<0.01或P<0.001),以0.5mg/kg体重组增高最显著;ConA诱导的T细胞转化率显著增高,也以0.5mg/kg体重组为著;LPS诱导的B细胞转化率增高,以10mg/kg体重组最显著.结论 MLT在体内和体外均可减轻电离辐射诱导的小鼠淋巴细胞损伤,对免疫功能具有保护作用. 展开更多
关键词 电离辐射损伤 防护作用 小鼠 ^3H-TdR掺入率 DNA裂解率 淋巴细胞转化率 脾脏淋巴细胞 褪黑素(MLT) 荧光分光光度法 X射线全身照射 LPS诱导 剂量依赖性 凋亡小体 腹腔注射 胸腺细胞 T细胞转化率 淋巴细胞损伤 ConA 细胞数量
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两种微量DNA提取方法的比较 预览 被引量:3
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作者 张萱 王珍琦 +4 位作者 史杰萍 赵景春 于雅琴 尉军 《吉林大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期 636-639,共4页
目的:比较Promega Wizard Genomic DNA纯化试剂盒(PWGDPK)和国产星普液体微量DNA提取试剂盒(SLDPK)提取DNA的效果,探讨从冷冻保存的人外周血中提取基因组DNA的最佳方案.方法:采用反复冻融3次并在-20℃冻存1年的12例健康成人外周血样品,... 目的:比较Promega Wizard Genomic DNA纯化试剂盒(PWGDPK)和国产星普液体微量DNA提取试剂盒(SLDPK)提取DNA的效果,探讨从冷冻保存的人外周血中提取基因组DNA的最佳方案.方法:采用反复冻融3次并在-20℃冻存1年的12例健康成人外周血样品,分别应用两种试剂盒提取基因组DNA,并采用吸收光谱法、琼脂糖凝胶电泳和PCR扩增等方法分别对提取的基因组DNA进行对比鉴定.结果:PWGDPK提取的DNA浓度为15.0~130.0 mg·L-1[(74.8±39.3)mg·L-1],而SLDPK为15.5~37.0 mg·L-1[(26.6±6.2)mg·L-1],前者显著高于后者(t=4.119,df=11,P<0.005).但两种试剂盒提取的基因组DNA纯度都不高,大多数样品A260/A280比值偏离了1.8~2.0范围.PWGDPK提取的12个基因组DNA样品,琼脂糖凝胶电泳后都可见电泳带,9个条带较深,3个条带较浅.SLDPK提取的样品中,只有7个可见较浅的电泳带.应用两种试剂盒提取的12个基因组DNA样品作为模板进行PCR反应后,在rs1171558SNP位点均有11个样品(91.7%)获得目的片段;在rs2248745 SNP位点,应用SLDPK只有4个样品(33.3%)获得目的片段,应用PWGDPK有10个样品(83.3%)获得目的片段,后者明显优于前者.结论:PWGDPK比SLDPK更适合于从长期冷冻保存且反复冻融过的全血中提取基因组DNA. 展开更多
关键词 DNA/分离和提纯 聚合酶链反应 基因组
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蛋白激酶PKCθ的研究进展 预览 被引量:9
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作者 徐瑞明 金顺子 +1 位作者 《吉林大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期 640-644,共5页
蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)家族作为第二信使在多条信号通路中发挥着重要作用,具有广泛的生物学效应.PKCθ作为这个家族的一个成员有选择性地主要表达在T淋巴细胞和骨骼肌,对于T细胞的正常发育和全面活化有着重要意义.在胰岛素耐... 蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)家族作为第二信使在多条信号通路中发挥着重要作用,具有广泛的生物学效应.PKCθ作为这个家族的一个成员有选择性地主要表达在T淋巴细胞和骨骼肌,对于T细胞的正常发育和全面活化有着重要意义.在胰岛素耐受的2型糖尿病的发生以及在一些肿瘤的形成、远处转移和耐药性的出现中扮演着重要角色,因此成为近几年研究的热点之一. 展开更多
关键词 蛋白激酶C 转录因子 细胞凋亡 胰岛素 细胞周期
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电离辐射诱导免疫细胞旁效应的实验研究 被引量:3
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作者 金顺子 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期 114-115,共2页
目的探讨不同剂量电离辐射在体外诱导免疫细胞的旁效应.方法用3H-TdR掺入法观察未受照射的EL-4细胞的增殖效应,用硝酸盐还原法测定受照射的J774A.1细胞分泌一氧化氮(NO)的含量.结果在受高、低剂量照射的抗原递呈细胞(J774A.1)和未受照射... 目的探讨不同剂量电离辐射在体外诱导免疫细胞的旁效应.方法用3H-TdR掺入法观察未受照射的EL-4细胞的增殖效应,用硝酸盐还原法测定受照射的J774A.1细胞分泌一氧化氮(NO)的含量.结果在受高、低剂量照射的抗原递呈细胞(J774A.1)和未受照射的T淋巴细胞(EL-4)的共培养体系中,0.075 Gy X射线照射的J774A.1细胞使EL-4细胞的增殖增强,而2 Gy X射线照射的J774A.1细胞则使EL-4细胞的增殖抑制;较大剂量X射线照射后J774A.1细胞分泌NO量明显增多,可能影响共培养的T细胞的增殖反应.结论低剂量辐射可诱导兴奋性或有益的旁效应,其机理有待进一步阐明. 展开更多
关键词 免疫细胞 旁效应 实验研究 辐射诱导 J774A.1细胞 ^3H-TdR掺入法 EL4细胞 X射线照射 硝酸盐还原法 抗原递呈细胞 细胞分泌 共培养体系 T淋巴细胞 低剂量照射 低剂量辐射 体外诱导 电离辐射 不同剂量 增殖效应 一氧化氮
HTR2A基因多态性与精神分裂症的关系 预览 被引量:1
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作者 张海英 谢林 +5 位作者 胡颖 丽波 鞠桂芝 史杰萍 于雅琴 《吉林大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期 755-757,共3页
目的:探讨5-羟色胺2A(HTR2A)基因多态性与精神分裂症的关系.方法:在54个汉族精神分裂症核心家系中,以PCR和限制性片段长度多态性(RFLP)方法对HTR2A基因编码区序列第102碱基(rs6313位点)单核苷酸多态性(SNP)进行检测.结果:HTR2A基因的rs6... 目的:探讨5-羟色胺2A(HTR2A)基因多态性与精神分裂症的关系.方法:在54个汉族精神分裂症核心家系中,以PCR和限制性片段长度多态性(RFLP)方法对HTR2A基因编码区序列第102碱基(rs6313位点)单核苷酸多态性(SNP)进行检测.结果:HTR2A基因的rs6313位点基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡;单倍型相对风险分析(HRR)表明,HTR2A基因rs6313位点与精神分裂症无关联(χ2=1.852,df=1,P=0.174);传递不平衡检验(TDT)显示,健康的杂合子父母及其患精神分裂症子女之间不存在显著的传递不平衡(χ2=1.786,df=1,P=0.181),即杂合子父母传递给患病子女的等位基因无差异;HTR2A基因的rs6313位点等位基因频率与精神分裂症的怪异行为(χ2=5.576,df=1,P=0.018)和意志贫乏(χ2=8.322,df=2,P=0.016)两种临床症状相关.结论:HTR2A基因的rs6313位点多态性可能与精神分裂症无关,但不能排除该位点与精神分裂症临床症状相关联. 展开更多
关键词 精神分裂症/遗传学 染色体13q14 单核苷酸多态性 HTR2A基因
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褪黑素对小鼠脾淋巴细胞电离辐射损伤的防护作用 预览
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作者 张萱 龚守良 +1 位作者 张铭 《辐射防护》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期 31-35,共5页
本文旨在探讨体内补充褪黑素(melatonin,MLT)对电离辐射所致小鼠脾淋巴细胞损伤的影响及其机制.实验采用昆明小鼠,连续1周每天腹腔注射0.1 mg/kg(体重)的MLT,第8天给予1~4 Gy全身照射,24 h后检测脾淋巴细胞数量的变化.另外,小鼠腹腔单... 本文旨在探讨体内补充褪黑素(melatonin,MLT)对电离辐射所致小鼠脾淋巴细胞损伤的影响及其机制.实验采用昆明小鼠,连续1周每天腹腔注射0.1 mg/kg(体重)的MLT,第8天给予1~4 Gy全身照射,24 h后检测脾淋巴细胞数量的变化.另外,小鼠腹腔单次注射0~2.5 mg/kg(体重)的MLT,60 min后给予2 Gy X射线全身照射,12 h后检测脾淋巴细胞凋亡及细胞周期时相(用流式细胞术)和DNA裂解率(用荧光分光光度法)的变化.结果发现:小鼠连续1周腹腔注射MLT,1.0~4.0 Gy照射后24 h,脾淋巴细胞数呈剂量依赖性降低(p<0.01);而受照前连续1周注射MLT(0.1 mg*kg-1*d-1),预先给予MLT组脾淋巴细胞数比预先不给予MLT组显著增高(p<0.05).2 Gy X射线全身照射后12 h,细胞凋亡小体百分率和DNA裂解率与对照组相比显著升高(p<0.01),G0/G1期和G2+M期细胞百分数增高(p<0.05),S期细胞百分数降低(p<0.01),细胞发生G1和G2期阻滞;而照射前单次注射MLT,其凋亡小体百分率和DNA裂解率均显著降低(p<0.05或p<0.01),G1期阻滞缓解,G2期阻滞加剧.以上结果表明照射前预先补充MLT可减轻电离辐射所致小鼠脾淋巴细胞损伤,对小鼠免疫功能具有保护作用. 展开更多
关键词 脾淋巴细胞 小鼠 褪黑素 腹腔注射 损伤 电离辐射 照射 体重 百分率 数量
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