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浮法玻璃生产线冷端落板装置的改进 预览
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作者 赵畅 晓亮 资宇 《中国玻璃》 2019年第2期20-22,共3页
落板破碎装置是浮法玻璃冷端生产线上输送玻璃或落板破碎的专用装置,本文介绍了传统落板破碎装置的型式,并分析了新型浮法玻璃生产线冷端落板破碎装置的结构和特点,并就改进做了较为详尽的阐述。
关键词 浮法 冷端 落板破碎装置 除尘
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抑制NF-κB信号通路对缺氧诱导小鼠海马神经元HT22细胞损伤的影响
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作者 张雪峰 田风富 +4 位作者 红艳 杨树成 丛大伟 晓亮 郎立峰 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期4319-4323,共5页
本研究试图从细胞衰老和凋亡方面,探讨NF-κB信号通路抑制剂PDTC对缺氧诱导的小鼠海马神经细胞HT22的影响。实验研究以小鼠海马神经元细胞HT22细胞为细胞模型,设置4组,分别是Control组、缺氧组、缺氧+PDTC组、PDTC组(PDTC,NF-κB信号通... 本研究试图从细胞衰老和凋亡方面,探讨NF-κB信号通路抑制剂PDTC对缺氧诱导的小鼠海马神经细胞HT22的影响。实验研究以小鼠海马神经元细胞HT22细胞为细胞模型,设置4组,分别是Control组、缺氧组、缺氧+PDTC组、PDTC组(PDTC,NF-κB信号通路抑制剂)。用CCK-8法检测细胞存活率;hochest33258染色观察细胞凋亡情况;Elisa检查细胞Caspase-3水平;Westernblotting检测衰老相关蛋白P16和P21的表达。CCK-8结果发现,与缺氧组比较,缺氧+PDTC组中HT22细胞数存活率明显升高;hochest33258染色结果示:与缺氧组比较,缺氧+PDTC组中hochest33258染色阳性HT22细胞数目显著降低;Elisa结果显示,缺氧+PDTC组HT22细胞中Caspase-3水平与缺氧组比较显著降低。Westernblotting结果显示:与缺氧组比较,缺氧+PDTC组HT22细胞中衰老相关蛋白P16和P21表达明显降低。本研究初步结果表明,运用PDTC抑制NF-κB信号通路能有效拮抗缺氧对小鼠海马细胞HT22细胞的损伤作用。 展开更多
关键词 NF-ΚB信号通路 细胞衰老 细胞凋亡
血肿穿刺引流术对脑出血大鼠血脑屏障通透性及神经细胞凋亡的影响
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作者 孙基栋 +3 位作者 王佳 晓亮 张晨 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1087-1090,共4页
目的从分子水平探讨血肿穿刺引流术治疗脑出血的机制。方法24只健康雄性SD大鼠采用自体血基底节区注射法制备成脑出血模型后,按随机数字表法分为对照组(予正常饲养)和穿刺引流组(予血肿穿刺引流术治疗),每组12只。分别于手术前后对2组... 目的从分子水平探讨血肿穿刺引流术治疗脑出血的机制。方法24只健康雄性SD大鼠采用自体血基底节区注射法制备成脑出血模型后,按随机数字表法分为对照组(予正常饲养)和穿刺引流组(予血肿穿刺引流术治疗),每组12只。分别于手术前后对2组大鼠行改良神经损伤严重性评分(mNSS),并各取6只行HE染色、TUNEL法检测血肿周围脑组织中凋亡神经细胞数,各取6只检测脑内伊文思蓝(EB)渗透量。结果穿刺引流组术后mNSS评分[(11.01±1.63)分]较术前[(9.62±2.05)分]明显增加,亦较对照组[(10.13±0.82)分]明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。穿刺引流组血肿周围脑组织中凋亡神经细胞数[(136.56±13.35)个/mm^2]较对照组[(297.19±51.90)个/mm^2]明显减少,脑内EB渗透量[(289.67±122.43)μg/g脑组织]较对照组[(325.48±51.43)μg/g脑组织]明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论血肿穿刺引流术可改善血肿周围脑组织微环境,缓解血脑屏障损伤,抑制神经细胞凋亡,虽会导致暂时性神经功能损伤加重,但仍是脑出血的一种有效治疗方法。 展开更多
关键词 血肿穿刺引流术 脑出血 细胞凋亡 血脑屏障
下调胰岛素样生长因子2基因对HCT116结肠癌干细胞生物学特性的影响
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作者 赵欣 李季 +1 位作者 环秋 晓亮 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期580-586,共7页
目的探讨下调胰岛素样生长因子2(IGF2)基因对HCT116结肠癌干细胞生物学特性的影响。方法采用流式细胞分选技术利用CD133抗体从结肠癌HCT116细胞株分离结肠癌干细胞。采用流式细胞术检测分离前后CD133+细胞的比例,通过成球实验、免疫荧... 目的探讨下调胰岛素样生长因子2(IGF2)基因对HCT116结肠癌干细胞生物学特性的影响。方法采用流式细胞分选技术利用CD133抗体从结肠癌HCT116细胞株分离结肠癌干细胞。采用流式细胞术检测分离前后CD133+细胞的比例,通过成球实验、免疫荧光染色、流式细胞术测定肿瘤干细胞标志蛋白的表达和软琼脂克隆形成实验等方法鉴定结肠癌干细胞。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blot检测结肠癌干细胞中IGF2的表达,应用小干扰RNA建立IGF2瞬时干涉细胞模型,通过细胞增殖实验、细胞周期和凋亡测定、细胞侵袭实验、克隆形成实验等观察下调IGF2对结肠癌干细胞生物学特性的影响。结果从结肠癌HCT116细胞中成功分离出干细胞,并可在无血清干细胞培养基中培养形成细胞球,连续消化传代后仍能保持与原代相同的形态特征。免疫荧光染色分析显示,干细胞标志物CD133和乙醛脱氢酶(ALDH)在结肠癌干细胞表面持续阳性表达。在软琼脂培养基上培养13 d后,非肿瘤干细胞组的克隆形成率为(28.10±2.66)%,肿瘤干细胞组的克隆形成率为(43.73±2.30)%,差异有统计学意义(P<0.01)。RT-qPCR结果显示,非肿瘤干细胞组和肿瘤干细胞组中IGF2的基因表达水平分别为1.06±0.24和2.17±0.51,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测结果显示,非肿瘤干细胞组和肿瘤干细胞组中IGF2的蛋白表达水平分别为1.10±0.55和2.14±0.23,差异有统计学意义(P<0.05)。下调IGF2基因后,结肠癌干细胞的增殖受到抑制(P<0.01);结肠癌干细胞中CD133+细胞的比例明显降低;细胞周期中G2/M期细胞比例增高(siNC组为23.46%,siIGF2组为60.14%),同时G0/G1期细胞比例降低(siNC组为40.77%,siIGF2组为17.73%);细胞凋亡率显著增高(siNC组为2.80%,siIGF2组为40.70%);siNC组和siIGF2组穿透至基底膜下室面的细胞数分别为109.00±16.37和54.00±8.19,差异有统计学意义(P<0.01 展开更多
关键词 结肠癌 干细胞 胰岛素样生长因子2 自我更新 干性维持
心脏骤停血清代谢组学研究
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作者 朱浙祥 陈芳 +5 位作者 蒋宇 邹联洪 协红 喻兰慧 晓亮 祝益民 《实用休克杂志(中英文)》 2019年第1期28-32,共5页
目的基于气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)测定心脏骤停家兔血清代谢组学指标,寻找心脏骤停血清差异代谢产物,初步揭示心脏骤停的病理生理变化。方法将2.5kg的雄性新西兰家兔按随机数字表法分为假手术组(n=24)和心脏骤停组(n=24)。采用窒... 目的基于气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)测定心脏骤停家兔血清代谢组学指标,寻找心脏骤停血清差异代谢产物,初步揭示心脏骤停的病理生理变化。方法将2.5kg的雄性新西兰家兔按随机数字表法分为假手术组(n=24)和心脏骤停组(n=24)。采用窒息法制备心脏骤停家兔模型;与心脏骤停前、自主循环恢复后30min,心脏骤停后24h收集动脉血样,进行血气分析和通过GC-MS测定两组血浆中的小分子代谢产物,并对其进行代谢轮廓分析,筛选相关差异代谢产物。结果与正常对照组比,LPS组小鼠血清中炎症因子TNF-和IL-1以及黏附分子ICAM-1,VCAM-1和E-selectin水平明显升高,IL-6变化不明显,肺湿干重比增加,肺组织间隔增宽,炎症细胞浸润。与LPS组相比,葛根素组小鼠血清中炎症因子TNF-和IL-1以及黏附分子ICAM-1,VCAM-1和E-selectin水平明显降低,IL-6变化不明显,肺湿干重比下降,肺组织间隔增宽程度降低,炎症细胞浸润减少。结论用GC-MS检测心脏骤停家兔的血清代谢特征发生明显改变,糖类、脂类、氨基酸、和核酸多种代谢通路发生紊乱。 展开更多
关键词 心脏骤停 代谢组学 窒息
地下水封洞库渗水特征与治理方法 预览
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作者 晓亮 梁建毅 +1 位作者 李康林 《山西建筑》 2019年第6期72-73,共2页
以黄岛地下水封洞库为例,分析得知洞室渗水类型主要有断层渗水和优势裂隙渗水,在综合考虑减少渗水量、维持地下水位稳定兼顾围岩稳定性的基础上,提出了"短孔密布"布设注浆孔与"短锚密布"支护的新方式,以此来避免长... 以黄岛地下水封洞库为例,分析得知洞室渗水类型主要有断层渗水和优势裂隙渗水,在综合考虑减少渗水量、维持地下水位稳定兼顾围岩稳定性的基础上,提出了"短孔密布"布设注浆孔与"短锚密布"支护的新方式,以此来避免长孔可能打穿隔水岩板所导致的工程风险。 展开更多
关键词 水封性 地下水位 渗水量 注浆封堵
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株行距配置对苏打盐碱地水稻产量形成及稻米品质的影响 预览
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作者 晓亮 齐春艳 +2 位作者 侯立刚 马巍 《中国农学通报》 2019年第10期1-6,共6页
旨在优化出适合盐碱水田水稻种植的群体结构,提高水稻产量。以‘吉粳809’为材料,试验采取裂区设计,研究不同群体结构对水稻农艺性状及稻米外观品质、碾米品质和蒸煮品质的影响。结果表明:A3B2处理的产量、一次枝梗实粒数、二次枝梗实... 旨在优化出适合盐碱水田水稻种植的群体结构,提高水稻产量。以‘吉粳809’为材料,试验采取裂区设计,研究不同群体结构对水稻农艺性状及稻米外观品质、碾米品质和蒸煮品质的影响。结果表明:A3B2处理的产量、一次枝梗实粒数、二次枝梗实粒数和总粒数分别比对照A4B3增加31.4%、16.1%、18.9%和6.3%,有效穗数和株高分别比对照A4B3减少24.5%,4.5%。行距和株距的互作效应对产量和有效穗数有显著影响,对总粒数、实粒数和千粒重影响不显著。不同行距间,株距间对产量、总粒数和实粒数影响不显著,对有效穗数影响显著。A3B2处理条件下整精米率高于对照处理。随着行距和株距的增加,稻米的垩白度和垩白粒率降低,对蛋白质和直链淀粉影响较小,变化范围分别在6.54%~7.16%,17.2%~19.3%。 展开更多
关键词 水稻 盐碱水田 农艺性状 稻米品质 产量 群体结构
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吉林西部稻区分期收获对稻米品质的影响
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作者 晓亮 侯立刚 +2 位作者 齐春艳 马巍 《东北农业科学》 北大核心 2019年第3期5-8,共4页
以水稻品种吉粳809和吉粳88为材料,开展分期收获试验,测定稻米品质相关指标,研究分期收获对各品种稻米品质的影响。结果表明,不同收获时期对各品种整精米率、垩白粒率、垩白度、直链淀粉含量、胶稠度和蛋白质含量均有影响。吉粳809在9... 以水稻品种吉粳809和吉粳88为材料,开展分期收获试验,测定稻米品质相关指标,研究分期收获对各品种稻米品质的影响。结果表明,不同收获时期对各品种整精米率、垩白粒率、垩白度、直链淀粉含量、胶稠度和蛋白质含量均有影响。吉粳809在9月20日收获,其整精米率可以达到70%以上,垩白粒率较低。吉粳88在9月20日收获整精米率最高,为73.4%,晚收获5~10d,垩白粒率增加,垩白度变化较小,差异未达到显著水平。 展开更多
关键词 分期收获 整精米率 垩白粒率 垩白度 胶稠度 蛋白质含量
储油地下水封洞库运营期的观测 预览
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作者 晓亮 《化工管理》 2019年第16期125-126,共2页
中国地下水封洞库技术起步较晚,加上石化行业在地下工程方面的局限性,使得洞库的运营方面缺少经验,尤其是在监测方面更是一片空白。文章通过分析地下水封洞库的工作原理、对地下水封洞库运营期项目的监测以及出现的问题,针对性地提出改... 中国地下水封洞库技术起步较晚,加上石化行业在地下工程方面的局限性,使得洞库的运营方面缺少经验,尤其是在监测方面更是一片空白。文章通过分析地下水封洞库的工作原理、对地下水封洞库运营期项目的监测以及出现的问题,针对性地提出改善意见。 展开更多
关键词 水封洞库 地下水 运营监测
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海德堡四色机的印版水膜控制要点 预览
10
作者 王永峰 陈卫家 晓亮 《印刷技术》 2019年第5期31-32,共2页
在地图印刷中,诸多印刷故障都与水有关,所以水墨平衡显得尤为重要。而只有了解和掌握印版水膜形成过程,才能更好地控制水墨平衡,减少印刷故障的发生。印版水膜是由润版装置中的水斗液经水辊传递和挤压在印版上形成的一层薄而均匀的膜,... 在地图印刷中,诸多印刷故障都与水有关,所以水墨平衡显得尤为重要。而只有了解和掌握印版水膜形成过程,才能更好地控制水墨平衡,减少印刷故障的发生。印版水膜是由润版装置中的水斗液经水辊传递和挤压在印版上形成的一层薄而均匀的膜,其控制好坏直接影响地图印刷过程中的水墨平衡和印品质量。笔者从多年的工作经验出发,梳理了海德堡四色机印版水膜控制中应注意的几个问题,希望能给大家一些启示。 展开更多
关键词 计量辊 串水辊 辊间压力 靠版水辊 海德堡
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从地方探索到中央推广:政府创新扩散的影响机制——基于36个案例的清晰集定性比较分析
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作者 晓亮 侯凯悦 张洺硕 《公共管理学报》 CSSCI 北大核心 2019年第3期157-167,176共12页
有关政府创新扩散的文献对各影响因素的分散研究较多,而对多因素的组合路径缺少探索。以此为出发点,文章运用清晰集定性比较分析方法(csQCA)研究了36项地方政府创新全面推广的多因素组合路径。结果表明:政治资源通过代理人和行政层级因... 有关政府创新扩散的文献对各影响因素的分散研究较多,而对多因素的组合路径缺少探索。以此为出发点,文章运用清晰集定性比较分析方法(csQCA)研究了36项地方政府创新全面推广的多因素组合路径。结果表明:政治资源通过代理人和行政层级因素对地方创新扩散发挥作用;东部的地区性先进经验相比中西部更容易得到推广;创新评价机制应在注重地方效益的基础上更加关注推广能力;政府创新扩散存在显著的实践需求导向与渐进展开的次序逻辑。通过将研究结果置于地方创新与国家治理关系的问题框架内,可以得到两点实践启示:一是突出地方本位;二是提高作为创新推广正式渠道的科层组织政策议程对地方创新的主动吸纳程度。本研究对于从政府创新扩散的角度认识中国国家治理基本特点和规律有一定参考价值。今后研究有待于更多地结合国家治理结构以增强分析的深度和理论性。 展开更多
关键词 政府创新 扩散 影响机制 定性比较分析
少数民族文化元素与当代油画创作 预览
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作者 晓亮 王菲 《艺术科技》 2019年第6期155-156,共2页
少数民族文化元素多种多样,为当代油画创作提供了丰富的可借鉴的元素,本文从三个方面研究了少数民族文化元素对油画创作的影响。
关键词 少数民族文化元素 油画创作 现状 影响 意义
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壮族少数民族资源在油画创作中的开发与应用
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作者 晓亮 王菲 《艺术品鉴》 2019年第5X期30-31,35共3页
本文选取最具代表性的壮族少数民族资源,例如干栏式建筑、壮族服饰、铜鼓文化等,将具有壮族特色的元素运用在油画创作中,丰富和拓宽广西本土油画创作的内容,最终达到油画民族化的目的。
关键词 壮锦 干栏式建筑 壮族服饰 铜鼓 花山岩画 油画创作
不同株行距配置对盐碱地水稻产量构成因素及干物质积累与分配的影响 预览
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作者 晓亮 齐春艳 +2 位作者 侯立刚 马巍 《江苏农业科学》 2019年第15期122-125,共4页
采用裂区设计,以吉粳809为试验材料,研究不同株行距配置对盐碱地水稻农艺性状和干物质量转移分配的影响。结果表明,行距25cm、株距13cm处理产量达到最高,为9930.66kg/hm2,比对照增产31.5%,每穗实粒数和总粒数最高,有效穗数与对照比减少2... 采用裂区设计,以吉粳809为试验材料,研究不同株行距配置对盐碱地水稻农艺性状和干物质量转移分配的影响。结果表明,行距25cm、株距13cm处理产量达到最高,为9930.66kg/hm2,比对照增产31.5%,每穗实粒数和总粒数最高,有效穗数与对照比减少24.6%。通过相关分析发现每穗实粒数、总粒数与产量呈正相关关系,有效穗数与产量呈负相关关系。不同处理干物质积累开始时期、干物质形成快增期持续天数、干物质积累量最大出现日和最大干物质形成速率不同。水稻在孕穗前,由于前期植株矮小,群体内个体的竞争较小,水稻干物质量积累较少,不同株行距配置在开花后对单株水稻干物质积累的影响较大。适宜的群体结构有利于拔节期和成熟期干物质积累。不同株行距配置对水稻植株转运率和贡献率的影响不相同,其中以行距25cm、株距13cm处理收获指数较高。 展开更多
关键词 水稻 盐碱地 农艺性状 群体结构 产量 干物质量
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植物保护专业《农药残留分析》课程实验教学方法初探 预览
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作者 晓亮 姬春红 +2 位作者 唐文伟 李雪生 谭辉华 《教育教学论坛》 2019年第15期190-191,共2页
农药残留分析技术在保障公众舌尖上的安全中发挥着极其重要的作用,《农药残留分析》是植物保护专业的必修课程之一,本文将从农药残留分析实验教学的重要性、趣味性、实用性、时效性、主观能动性及课程的设置等方面初步探讨该课程的教学... 农药残留分析技术在保障公众舌尖上的安全中发挥着极其重要的作用,《农药残留分析》是植物保护专业的必修课程之一,本文将从农药残留分析实验教学的重要性、趣味性、实用性、时效性、主观能动性及课程的设置等方面初步探讨该课程的教学方法,旨在使学生在全面掌握该课程理论知识的基础上增强专业技能。 展开更多
关键词 农药残留分析 实验课程 教学探讨
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QuEChERS-气相色谱法测定甜豆中3种农药残留
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作者 姬春红 +1 位作者 曾东强 晓亮 《农药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期118-120,共3页
[目的]建立QuEChERS-气相色谱法(GC)快速准确测定甜豆全果和豆荚中毒死蜱、联苯菊酯和高效氯氟氰菊酯3种农药残留的方法。[方法]采用QuEChERS前处理的方法对样品进行净化处理,即甜豆全果和荚中毒死蜱、联苯菊酯、高效氯氟氰菊酯经乙腈... [目的]建立QuEChERS-气相色谱法(GC)快速准确测定甜豆全果和豆荚中毒死蜱、联苯菊酯和高效氯氟氰菊酯3种农药残留的方法。[方法]采用QuEChERS前处理的方法对样品进行净化处理,即甜豆全果和荚中毒死蜱、联苯菊酯、高效氯氟氰菊酯经乙腈高速涡旋提取,上清液经无水硫酸镁和N-丙基乙二胺(PSA)、石墨化炭黑(GCB)净化后过有机膜进行气相色谱电子捕获检测器(ECD)检测,以基质匹配标准溶液外标法定量。[结果]3种农药的线性相关系数均不低于0.997,在0.01、0.1、1 mg/L的添加水平下,3种农药在甜豆全果基质、豆荚中方法回收率在75%-102%范围内,相对标准偏差(RSD)在1%~11%范围内,方法定量限(LOQ)为0.01 mg/L。[结论]该方法前处理简单快速、灵敏度高,适用于甜豆中毒死蜱、联苯菊酯、高效氯氟氰菊酯的检测。 展开更多
关键词 甜豆 气相色谱 农药残留 QUECHERS
不同生态条件对盐碱地水稻品种米质的影响 预览
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作者 齐春艳 晓亮 +2 位作者 侯立刚 马巍 《北方水稻》 CAS 2019年第1期13-15,共3页
选用晚熟品种吉粳88和早熟品种吉粳113为试验材料,研究不同生态条件对盐碱地水稻品种米质的影响。结果表明:不同生态条件对不同熟期水稻品种的碾米品质、外观品质和蒸煮品质影响不同。晚熟品种的碾米品质、外观品质和胶稠度易受生态条... 选用晚熟品种吉粳88和早熟品种吉粳113为试验材料,研究不同生态条件对盐碱地水稻品种米质的影响。结果表明:不同生态条件对不同熟期水稻品种的碾米品质、外观品质和蒸煮品质影响不同。晚熟品种的碾米品质、外观品质和胶稠度易受生态条件变化影响,早熟品种的垩白度受生态条件变化影响较大,两个不同熟期品种的直链淀粉含量受生态环境变化影响较小。 展开更多
关键词 碾米品质 外观品质 胶稠度 直链淀粉含量 垩白度
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关键课程发挥关键作用——基于2014—2018年高校思想政治理论课建设调查数据的分析
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作者 晓亮 沈壮海 《中国高等教育》 CSSCI 北大核心 2019年第9期27-30,共4页
思想政治理论课是落实立德树人根本任务的关键课程。课题组近五年来开展的调查表明,高校思想政治理论课教学的德育效果不断彰显;大学生对于思想政治理论课的积极评价稳步提升;五门思想政洽理论课建设呈现均衡发展的良好态势;但课程建设... 思想政治理论课是落实立德树人根本任务的关键课程。课题组近五年来开展的调查表明,高校思想政治理论课教学的德育效果不断彰显;大学生对于思想政治理论课的积极评价稳步提升;五门思想政洽理论课建设呈现均衡发展的良好态势;但课程建设中的区域不平衡问题等仍需引起更多关注。 展开更多
关键词 思想政洽理论课 关键课程 建设成效 调查研究
浅析桂西北地域特色在高校油画风景课程中的应用 预览
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作者 晓亮 《美术教育研究》 2019年第11期114-115,共2页
将桂西北地域特色融入油画风景写生教学,有利于培养学生的地域情结和民族精神。该文分析油画风景课程的地位、作用以及存在的问题,提出教师应在油画风景教学中加强地域特色写生,引导学生创作出具有地域特色的油画风景作品。
关键词 桂西北 地域特色 油画风景教学
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印记基因IGF2在胰腺癌干细胞中的印记表达研究 预览
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作者 赵欣 晓亮 +1 位作者 韩薇 苏龙 《华中科技大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期149-153,共5页
目的研究印记基因IGF2在胰腺癌干细胞中的印记表达情况。方法利用流式细胞分选技术通过CD133抗体从胰腺癌细胞株ASPC分离出胰腺癌干细胞;流式细胞术检测分离前后CD133^+细胞的比例;采用无血清悬浮培养法富集胰腺癌干细胞;通过成球实验... 目的研究印记基因IGF2在胰腺癌干细胞中的印记表达情况。方法利用流式细胞分选技术通过CD133抗体从胰腺癌细胞株ASPC分离出胰腺癌干细胞;流式细胞术检测分离前后CD133^+细胞的比例;采用无血清悬浮培养法富集胰腺癌干细胞;通过成球实验、免疫荧光染色、流式细胞术测定肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)标志蛋白表达,以及通过软琼脂克隆形成实验等方法鉴定ASPC胰腺癌干细胞;以测序法分析IGF2在胰腺癌干细胞中的印记表达情况;应用qRT-PCR法研究胰腺癌干细胞中IGF2在基因水平上的表达;应用Western blot方法研究胰腺癌干细胞中IGF2在蛋白水平上的表达。结果利用流式细胞分选技术通过CD133抗体标记,从胰腺癌细胞ASPC中分离出胰腺癌干细胞,其可在干细胞培养液中成球培养,连续消化传代后仍保持与原代相同的形态特征;免疫荧光检测发现CSCs标志物CD133和乙醛脱氢酶(aldehyde dehydrogenase,ALDH)在胰腺癌干细胞表面持续阳性表达;软琼脂克隆形成实验显示CSCs的克隆形成能力增强;对分选前后肿瘤细胞CD133表达检测,显示超过90%的成球细胞为CD133阳性;通过测序法分析IGF2在胰腺癌干细胞中的印记表达情况,结果显示胰腺癌干细胞存在IGF2印记丢失(loss of imprinting,LOI),而与其对应的非干性肿瘤细胞(non-stem cancer cells,nSCCs)的印记状态为印记保持(maintance of imprinting,MOI);应用qRT-PCR法研究胰腺癌干细胞中IGF2在基因水平上的表达,结果显示与nSCCs相比,IGF2在CSCs中的表达明显升高;应用Western blot方法研究CSCs中IGF2在蛋白水平上的表达,结果显示与nSCCs相比,IGF2在CSCs中的表达明显升高。结论胰腺癌干细胞存在IGF2印记丢失,从而导致IGF2的高表达,IGF2印记丢失可能是胰腺癌干细胞的标志性特征之一。 展开更多
关键词 胰腺癌 肿瘤干细胞 IGF2 印记丢失
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